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薄层色谱方法总结

1、一般根据相似相溶原则，需要注意，极性相差大的不混溶。

2、一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹

象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较

“拖”），最好是换溶剂。

3、待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间

4、一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，

乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等

的分离；

5、中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适

合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；

6、强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很

大的生物碱类化合物的分离。

7、甲酸通常指的是浓度85%左右的，含有水。

8、对于极性化合物，使用正丁醇对斑点扩散影响较小，因为化合物和硅胶的作用强。

9、点样器点样于薄层板上,一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于

2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。若因样品溶液太稀，可重复点样，

但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，

而影响分离效果。

10、PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:1

8年来我用这四种体系,没有出现过什么问题.我一直在用的是乙酸乙酯：环已烷，不断调

节比例，直到有满意的Rf值，有拖尾时可能要加酸或碱，我一般乙酸和三乙胺

11、铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，

水蒸发后，板表面较粗糙。

12、样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。样品溶液的溶

剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放

入干燥器里晾干。

13、选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，

如果分层，取用体积大的一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇

展开缸来配制展开剂。混合不均匀和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败

14、展开系统的饱和一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨

水或硫酸。把待展开的板放入两槽间的平台，斜架着，盖上展开缸的盖子。让展开剂的

蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半个小时

左右。展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的吸附平衡

影响不大，当然动作应该尽量轻、快。

15、温湿度对薄层影响都很大。不冻结的前提下，通常温度越低分离越好，较难的分离

需在低温下分离，例如人参皂苷。湿度的影响，估计主要是影响薄层板的吸附能力，导

致选择性（容量因子）的变化，湿度应根据实际情况确定。温度控制使用空调器或冰柜，

湿度控制是通过在另一展开槽放置相应浓度的硫酸。

16、常用混合溶剂极性顺序：

环己烷:乙酸乙酯（8:2）氯仿:丙酮（95:5）苯:丙酮（9:1）苯:乙酸乙酯（8:2）氯仿:乙

醚（9:1）苯:甲醇（95:5）苯:乙醚（6:4）环己烷:乙酸乙酯（1:1）氯仿:乙醚（8:2）

氯仿:甲醇（99:1）苯:甲醇（9:1）氯仿:丙酮（85:15）苯:乙醚（4:6）苯:乙酸乙酯（1:1）

氯仿:甲醇（95:5）氯仿:丙酮（7:3）苯:乙酸乙酯（3:7）苯:乙醚（1:9）乙

醚:甲醇（99:1）乙酸乙酯:甲醇（99:1）苯:丙酮（1:1）氯仿:甲醇（9:1）

17、将(2.5×7.5)cm2载玻片依次用水和乙醇洗净，晾干。要求玻片无划痕,水膜均匀,完

全洁净。置玻片于80℃烘箱干燥,转入干燥器冷却至室温,备用。载板要求平滑清洁，没

有划痕，在使用前可用洗涤液或肥皂水洗涤，再用水冲洗干净。判断载板是否洗干净的

标准：拿在手上立起来，如果发现水不是呈股流下，而是呈瀑布状态流下，说明玻璃已

经洗干净。（真正洗干净的玻璃，很