DB51T 1419-2012 大熊猫须癣毛癣菌病检验技术规范.docxVIP

ICS11.220B41

DB51

四川省地方标准DB51/T1419—2012

大熊猫须癣毛癣菌病检疫技术规范

2012-03-30发布2012-05-01实施

四川省质量技术监督局发布

I

DB51/T1419—2012

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4形态与生物学特性 1

5临床诊断 2

6实验室诊断 2

7结果判定 3

附录A（资料性附录）沙堡弱氏葡萄糖琼脂培养基 4

附录B（资料性附录）试剂和染液配制 5

参考文献 6

II

DB51/T1419—2012

前言

本标准由四川出入境检验检疫局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准发布。

本标准起草单位：四川出入境检验检疫局、四川农业大学、中国保护大熊猫研究中心。

本标准主要起草人：余华、杨光友、严玉宝、张和民、李德生、陈世界、王承东、胡娟、崔鹏博、周岷江。

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DB51/T1419—2012

大熊猫须癣毛癣菌病检疫技术规范

1范围

本标准规定了大熊猫须癣毛癣菌病的诊断与检疫方法。本标准适用于大熊猫须癣毛癣菌病的常规诊断与检疫。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T541动物疫病实验室检验采样方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

大熊猫须癣毛癣菌病TrichophytosisforGiantpanda

指须癣毛癣菌（Trichophytonmentagrophytes）侵入大熊猫皮肤、黏膜及其附属物（毛发、爪等），并引起的一种感染性疾病。患病动物是本病的传染源，主要因接触而传染，也可经污染的用具或以饲养管理人员为媒介等间接经皮肤接触而传染，一年四季均可发生，但以潮湿的春、秋两季较多见。

4形态与生物学特性

4.1分型

须癣癣菌（T.mentagrophytes)又称石膏样毛癣菌。该菌在葡萄糖蛋白胨琼脂上，28°C培养，生长迅速。根据菌落形态，可分为羊毛状或绒毛状型、粉末状或颗粒状型2种类型。

4.2特性

4.2.1羊毛状或绒毛状型

白色羊毛状菌丝充满斜面，绒毛状菌丝短而整齐，整个菌落只占斜面的1/3～1/2。培养基背面颜色为淡黄或棕黄色。镜检只见较细的，分隔菌丝和卵圆形小分生孢子，小分生孢子有时集聚成葡萄状，偶见球拍状菌丝和结节状菌丝，无螺旋菌丝和大分生孢子。

4.2.2粉末状或颗粒状型

菌落表面为粉末状，色黄，充满斜面，培养基背面为棕黄或棕红色，镜检可见多种菌丝，如螺旋菌丝、球拍状菌丝、结节状菌丝等。小分生孢子呈球状，常聚成葡萄状。可见棒状大分生孢子，2～8个细胞，大小为40～60μm×5～9μm，外壁薄而光滑。

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DB51/T1419—2012

5临床诊断

成年及幼年大熊猫均可感染须癣癣菌。与其它外寄生虫混合感染时，兼有相应症状。单独感染大熊猫时病初可见患部（四肢、背臀部、耳、腹部等处）小片状脱毛，皮肤发红，粗糙；有鳞屑痂皮，鳞屑呈浅灰色至褐色；患部出现灰褐色痂皮损害。随着病程延长，脱毛面积加大，结有厚的鳞屑痂皮，去痂皮后基底渗血，患处被毛失去光泽，不易折。

6实验室诊断

6.1直接涂片染色镜检法

6.1.1试剂配制

10%KOH溶液配制见B.1；乳酸酚棉蓝染色液配制见B.2。

6.1.2镜检方法

按照NY/T541“样品的采集”有关章节要求，刮取每只疑似患病动物患处的鳞屑、痂皮、粘有渗出液的被毛适量，将所取标本直接置于玻片上，滴加10%KOH溶液2滴，使之透明软化后再滴加乳酸酚棉蓝染色液1滴，加盖玻片，在光镜下检查。观察到菌丝片段，即可初步判定有皮肤真菌感染。

6.2病原菌分离

6.2.1斜面培养法，又称大培养。6.2.1.1材料

沙堡弱氏葡萄糖琼脂培养基，制备见附录A；待检标本；75%酒精；接种针；温箱。6.2.1.2方法

6.2.1.2.1将待检标本（如皮屑、甲屑或脱落的毛）用75%酒精浸泡数分钟，以杀死表面细菌，然后用灭菌生理盐水充分洗涤。

6.2.1.2.2按无菌操作法，用接种针将标本接种在含青霉素、链霉素的沙堡弱氏葡萄糖琼脂斜面培养

基上。

6.2.1.2.3试管