植物组织培养实验报告.pdfVIP

古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有坚忍不拔之志。——苏轼

摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物

激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无

菌操作。实验结果显示第2组即MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第3组

即MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L)培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳

的愈伤组织诱导组合。

关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织

1.1实验材料：大豆子叶

1.2实验试剂与仪器

〔1〕试剂：75%酒精、MS干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂〔NAA、2，4-D、

KT、6-BA〕、无菌水、升汞、NaOH溶液

〔2〕仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、

不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁

置架、烧杯、电炉。

1.3实验方法

培养基的配制与灭菌

1.3.1.1配制培养基的准备阶段

〔1〕准备80个培养试管及封口膜，2个小培养皿、1个大培养皿，用洗衣粉、自

来水洗净，再用蒸馏水把每一个培养试管、润洗一下。带晾干后将试管编号1-80；

〔2〕在称量纸上用百分之一天平分别称取1.5g琼脂4份，7.5g蔗糖4份，在烧杯里

用千分之一天平上称取1.185gMS干粉4份〔烧杯不要清洗〕；

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古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有坚忍不拔之志。——苏轼

〔3〕剪小圆纸片40，均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片

10，均分在两个大培养皿中。然后分别用报纸包好。

〔4〕把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。

1.3.1.2配制培养基

〔1〕在装有MS干粉的烧杯中按下表参加植物生长调节剂

实验所用的所有激素浓度均为0.5mg/mL

激素的加样量(ml)

编号培养基配置

6-BANAAKT2,4-D

MS+6-BA

10.50.25

〔1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)

MS+6-BA

21.00.5

〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)

3MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-0.250.5

4D(1.0mg/L)0.51.0

MS+KT〔1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)

〔2〕用量筒量取250ml〔稍多〕蒸馏水，取一个不锈钢杯子参加150ml蒸馏水和

称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾2min，再参加混合好的MS培养基1号和蔗糖，

混合沸腾2min，用剩余的