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PLK1的CRISPR/Cas9载体构建
摘要
选用人类肿瘤疾病相关的部分PLK1基因,ABCB1基因,构建一个U6启动子驱动的pegRNA(PrimeEditingGuideRNA)的CRISPR/Cas9基因编辑载体(pU6-pegRNA-GG-acceptor载体),转化大肠杆菌表达。
在NCBI网站上下载PLK1基因,ABCB1基因的基因序列,在addgene网站上下载pU6-pegRNA-GG-acceptor质粒载体的基因序列。根据酶切位点和相关原则来设计sgRNA,PCR扩增引物。同1个基因,设计3个Target位点,重组质粒表达来研究基因功
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