专题10 基因工程-2025年高考生物 热点 重点 难点 专练（北京专用）（解析版）.docx

专题10基因工程

目录

1.命题趋势：明考情知方向

2.重难诠释：知重难、掌技巧、攻薄弱

3.创新情境练：知情境练突破

4.限时提升练：（30min）综合能力提升

考点

三年考情分析

2025考向预测

基因工程

北京卷.T19）PCR扩增的原理与过程

北京卷.T19）,PCR扩增的原理与过程

（2023.北京卷.T21）基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用

（2022.北京卷.T21）基因表达载体的构建,转基因生物安全性

考点预测：基因工程及应用

考法预测：在特定情境下，通过设计合适的引物、利用特定限制酶剪切，进行基因编辑或基因拼接，达到改变特定基因、实现基因重组、获得融合蛋白等目的，操作过程复杂，所涉及的内容为当前最前沿的技术成果等。

重难点

（一）基因工程的基本操作程序

1.目的基因的筛选与获取

（1）方法：从基因文库中直接获取。基因文库类型:基因组文库（包含一种生物的所有基因）；部分基因文库（包含一种生物的一部分基因）（cDNA文库）。

（2）人工合成：逆转录法、化学合成法。

（3）利用PCR技术获取和扩增

2.基因表达载体的构建

（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使其能够表达和发挥作用。

（2）基因表达载体的组成和功能

将目的基因导入受体细胞

导入植物细胞：农杆菌转化法、花粉管通道法。

导入动物细胞：显微注射法。受体细胞：受精卵。

导入微生物细胞：Ca2+处理。可使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。

4.目的基因的检测与鉴定

检测水平

检测目的

检测方法

分子水平

目的基因是否插入到转基因生物染色体DNA上

PCR

目的基因是否转录出了mRNA

目的基因是否翻译出蛋白质

抗原—抗体杂交

个体水平

转基因生物是否表现出相应的特性

如抗虫、抗病的接种实验

高分技巧

（一）基因表达载体的构建

1.注意事项

（1）目的基因应插到启动子与终止子之间的部位。

（2）目的基因的插入不能破坏标记基因。

（3）切割质粒和获取目的基因的限制酶必须产生相同的末端。（碱基互补，便于连接）

2.两种酶切方法

（1）单酶切：用一种限制酶切割目的基因和质粒，所得目的基因与质粒两头的末端相同。在进行连接反应时，目的基因和载体是随机碰撞的，因此容易造成自身环化和反向连接(即目的基因的上下游方向颠倒地与载体相连，结果目的基因的转录从下游到上游，导致密码子全部改变，目的基因不能正常表达)。

（2）双酶切：用两种限制酶切割目的基因及质粒，可使目的基因与质粒两头的末端不相同，可避免自身环化和反向连接。

3.限制酶选择的要求

应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，以便将目的基因“切出”。

不能选择切割位点位于目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点内部的限制酶，以防破坏目的基因。

为避免目的基因和质粒的自身环化和反向连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因及质粒。

（建议用时：10分钟）

1．（新技术）我国科学家开发了一种利用自体肝细胞治疗遗传性肝病的新技术（如图）。用基因编辑技术对体外培养的患者肝细胞进行基因修复后，将细胞移植给人酪氨酸血症模型小鼠，小鼠肝功能得到有效改善。相关叙述错误的是（????）

A．用胶原蛋白酶或胰蛋白酶处理可分散肝组织细胞

B．基因编辑工具使肝细胞内致病基因修复为正常基因

C．此过程利用显微注射技术将正常基因导入肝细胞

D．使用免疫缺陷小鼠可避免异种移植引发的免疫排斥

【答案】C

【分析】在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞。然后，用培养液将细胞制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶或培养皿内，置于适宜环境中培养。

【详解】A、动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞，A正确；

B、分析图可知，将携带正常基因的重组腺病毒并利用CRISPR/Cas9基因编辑工具，可以使肝细胞内致病基因修复为正常基因，B正确；

C、分析图可知，该过程是利用载体——重组腺病毒将正常基因导入肝细胞，并不是利用显微注射技术将正常基因导入肝细胞，C错误；

D、免疫缺陷小鼠免疫功能受损，所以使用免疫缺陷小鼠可避免异种移植引发的免疫排斥，D正确。

故选C。

2．（联系生活）转基因抗虫棉在我国的种植面积已占全国棉花种植面积的90%。研究者利用PCR技术检测杂草中有无转基因成分，得到如下图所示结果。相关分析错误的是（????）

A．空白实验是未加入DNA模板得到的电泳结果

B．推测棉田杂草6、7与抗虫棉的亲缘关系较近

C．结果说明校园杂草与棉花间一定存在生殖隔离

D．转基因成分进入杂草体内可能会引发生态问题

【答案】C

【分析】由图可知，2转基因抗虫棉和棉田杂草6和7均含有