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以家为家，以乡为乡，以国为国，以天下为天下。——《管子》

实验十一IMViC与硫化氢试验

指导教师：李海花

周六第三组

学号：060122010041姓名：宋天佳专业：2010级水产养殖

学号：030212010025姓名：皇昊专业：2010级化学1班

学号：060122010055姓名：续鹏辉专业：2010级水产养殖

一、实验目的

了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。

二、实验原理

IMViC是I－吲哚（indoltest）、M－甲基红（methylredtest）、V－伏-普（Voges-Prolauer

test）和C－柠檬酸盐（citratetest）4个实验的缩写。这4个实验主要用来快速鉴别产气

杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一

定指标，则表示水质受粪便污染。产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将

两者分开。硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。

（一）吲哚试验（indoltest）

吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基

质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色。

色氨酸＋H2O色氨酸酶吲哚＋NH3＋丙酮酸

吲哚+对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚（红色）

只有部分细菌能产生色氨酸酶，从而具有分解色氨酸产生吲哚的能力，因此吲哚实验可

以作为一个生化检测指标。大肠杆菌产色氨酸酶实验结果为阳性（红色），产气肠杆菌不产

色氨酸酶实验结果为阴性（无色）。

（二）M-甲基红试验（methylredtest）

用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。细菌代谢糖产生酸使培养

基变酸（pH下降），使甲基红指示剂变色：橘黄色（pH6.3）红色（pH4.2）

尽管，所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸，但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别：

两者在培养早期产生有机酸，但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4，而产气肠杆菌则将有

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机酸转化为非酸性产物，使pH上升至6左右。因此，大肠杆菌为阳性（红色），产气肠杆

菌阴性（黄色）。

（三）伏-普实验（Voges-Prolauertest）

测定细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物（如丙酮酸）的能力。丙酮酸进行缩合、

脱羧生成乙酰甲基醇，此化合物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋

白胨中的精氨酸的胍基作用，生成红色化合物，及伏-普反应阳性，不产生红色化合物者为

反应阴性。碱性条件、加入少量含胍基的化合物可使反应更明显。

大肠杆菌不产丙酮酸实验结果为阴性（无色），产气肠杆菌产丙酮酸实验结果为阳性（红色）。

葡萄糖丙酮酸-CO2缩合乙酰乳酸-CO2脱羧乙酰甲基甲醇+OH--2H胍基+二乙

酰红色化合物

（四）柠檬酸盐试验（citratetest）

用来检测柠檬酸盐是否被利用，有些细菌以柠檬酸钠为碳源，培养基中的柠檬酸和磷酸

铵被分解后，产生碱性化合物，使pH升高，当加入1％溴麝香草酚蓝指示剂时，培养基就

会有绿色转变为深蓝色，溴麝香草酚蓝