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操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
验一
实验名称:双缩脲法测定血清总蛋白
实验目的与要求:掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理
及操作,熟悉总蛋白测定的临床意义,巩固分光光度计的使
用。
实验仪器、试剂:双缩脲试剂、的总蛋白标准液、分光
光度计、蒸馏水。
实验原理:蛋白质中的肽键在碱性溶液中能和二价铜离子作
用生成稳定的紫红色络合物,此反应和两个尿素分子缩
合
形成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用生成紫红色的
反
应相似,故称之为双缩脲反应,此种化合物在540nm处吸
光度与蛋白质含量在一定范围内成正比。
操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
:
、取3支试管,依次加入下列试剂
单位(ml)空白标准样本
双缩脲试剂1.01.01.0
37℃水浴10分钟
蒸馏水0.02--
标准液-0.02-
样本--0.02
2、混匀各管,37℃水浴10分钟,540nm,0.5cm比色杯空白
管调零,测定各管的吸光度。
实验现象与数据:记录各管的吸光度
结果分析与结论:TP(g/L)=A样/A标×70正常参考值:
65-80g/l
临床意义:
思考题:1、实验指导51页评价与思考第6题
2、叙述刻度移液管量取一定体积液体的操作过程
3、叙述分光光度计的使用操作步骤
操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
验四
实验名称:溴钾酚绿法测定血清白蛋白
实验目的与要求:掌握溴甲酚绿法测定血清白蛋白的基本原
理及操作,熟悉血清白蛋白测定的临床意义。
实验仪器、试剂:试剂、37g/l的蛋白标准液、分光光度
计、蒸馏水。
实验原理:血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷,在有
非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的染料溴钾酚绿
结合形成蓝绿色复合物,在628nm处其颜色深浅与白蛋白浓
度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,可求得血清中白
蛋白的含量。
操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
:
手工测试程序如下:
、取3支试管,依次加入下列试剂
单位ml样本标准空白
样本0.01--
标准-0.01-
蒸馏水--0.01
BCG试剂2.002.002.00
2、混匀,置室温10分钟,用波长628nm,比色杯光径0.5厘
米,空白管调零,测定各管的吸光度
实验现象与数据:记录各管的吸光度
结果分析与结论:Alb(g/L)=A样/A标×37参考值范围:
35-55g/l
G(g/L)=TP-A
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