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高三生物第一轮复习学历案64
基因工程1
【要点自测】
一、基因工程的理论基础
1._________是遗传物质的证明。
2.DNA双螺旋结构和_____________的确立。
3.遗传密码的破译:所有生物共用一套________________。
二、基因工程的操作工具
1.“分子手术刀”是指______________,其作用是识别双链DNA的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的______________________断开,从而产生______________或平末端。
2.“分子缝合针”是指______________,包括_______________和_________________两种,它们的作用是将两个DNA片段拼接成一个新的DNA分子,其中___________________只能连接黏性末端。
3.载体种类:质粒、_________________、动植物病毒等。
质粒作为载体所具备的条件及原因
条件
原因
稳定并具有_________________________
能使目的基因稳定存在且数量可扩增
有一个至多个________________位点
可携带多个或多种外源基因
具有特殊的_____________________
便于重组DNA的______________
无毒害作用
对受体细胞无毒害作用,避免受体细胞受到损伤
三、基因工程的基本操作程序
1.基因工程的基本操作四个步骤是(1)____________________、(2)________________________、
(3)__________________________________、(4)__________________________________。其中基因工程的核心是________________________________________。
2.获取目的基因的方法:常利用____________扩增目的基因;还可以通过构建_____________来获取目的基因或者_________________。
①PCR的过程有:(90℃以上)________→(50℃)_________→(72℃)_________。
②PCR过程需要:____________,_______________、四种__________________、_________________。
③PCR在___________________中自动完成,其扩增产物常用___________________________进行鉴定。
3.基因表达载体的构建需要______________________酶,二者的作用部位是__________________;一个基因表达载体的组成,必须有__________、__________、___________、___________等
(1)启动子作用:是____________识别和结合的部位,从而驱动_________________________。
(2)构建基因表达载体过程中,需要用___________(同一种或不同种)限制酶分别切割质粒和含有______________的DNA片段。实际操作中往往采用双酶切,其优点______________________
标记基因的作用是__________________________________________________
4.将目的基因导入受体细胞的几种常用的转化方法:
(1)将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是__________________,该方法需要把目的基因插入农杆菌的Ti质粒的T—DNA中的原因______________________________________。此外,还可采用_______________________法(该法为我国科学家独创)。
(2)导入动物细胞常采用_________________将目的基因注入___________。
(3)导入微生物细胞的方法是:用____________处理细胞,使细胞处于一种能______________的生理状态。
5.目的基因的检测与鉴定:
(1)检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因或目的基因是否转录出mRNA,一般采用的方法是___________________。
(2)检测目的基因是否表达出蛋白质的方法是________________________。
(3)除上述分子水平的检测外,还需要进行___________________水平的鉴定。如鉴定转基因抗虫棉培育是否成功的具体方法是_____________________________。
6.DNA探针是指用__
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