T CSTC 02—2023 甘蔗梢腐病抗性评价技术规程.pdfVIP

ICS65.020

CCSB15

CSTC

中国热带作物学会团体标准

T/CSTC02—2023

甘蔗梢腐病抗性评价技术规程

Technicalcodeofpracticeforresistantevaluationofsugarcanepokkahboengdisease

2023-10-10发布2023-11-15实施

中国热带作物学会发布

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国热带作物学会提出并归口。

本文件起草单位：广西大学、全国农业技术推广服务中心、广西壮族自治区农业科学院、广东省农

业科学院。

本文件主要起草人：张木清、姚伟、许誉芝、暴怡雪、史梦雅、陈保善、姚姿婷、邹承武、徐世强、

王继华、王泽平、胡琴、黄江锋、肖胜华、余凡、张积森、蒋洪涛、林镇跃、黄振、张桂英。

甘蔗梢腐病抗性评价技术规程

1范围

本文件确立了甘蔗梢腐病抗病性评价技术规程，规定了术语和定义、评价程序、接种体制备、接种、

病情调查及抗病性评价的要求。

本文件适用于甘蔗种质资源和甘蔗品种（系）对梢腐病的抗性评价。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

甘蔗梢腐病sugarcanepokkahboengdisease

由藤仓镰孢菌种复合体（FusariumfujikuroiComplex，FFC）的四个种“甘蔗镰孢菌（F.sacchari，

Fs）、层出镰孢菌（F.proliferatum，Fp）、轮枝镰孢菌（F.verticillioides，Fv）和新知镰孢菌

（

F.andiyazi，Fa）”引起的发生在甘蔗上的病害。

4评价程序

甘蔗梢腐病评价流程包括6个步骤，评价流程图见图1。

图1甘蔗梢腐病抗性评价流程

5接种体制备

5.1病原菌分离评价

用真菌分离培养的方法从梢腐病病叶上分离梢腐病病原物，并用病原物的特异引物ITS1/ITS4和

EF1/EF2进行PCR分子评价。梢腐病病原菌的详细信息见附录A。

5.2病原菌的保存

用50%甘油悬浮，于-80℃超低温冰箱进行长期保存。

5.3病原菌接种体制备

将保存的菌株活化至PDA培养基平皿上，置于28℃培养箱培养2d，再用无菌牙签挑取平板上的菌

落，接种到PDW培养基中，28℃摇床200rpm震荡培养5d，确定菌株生长至指数生长期。离心去上清培

养液，用ddH2O把菌液配制成浓度为1×106个/mL的真菌悬浮液。

6接种

6.1田间自然接种

6.1.1田间鉴定圃

通过人工营造，或设计在病害常发区域。鉴定圃的栽培条件（品种、土壤类型及施肥）应均匀一致，

且符合良好农业规范（GAP），设立保护区。

6.1.2田间试验设计

每个材料挑选蔗芽饱满、一致的种芽300个于春季种植在鉴定圃中。试验采用完全随机区组设计，

单行区，行长7m~10m、行距1.2m，3次重复，每个小区种植100个芽，试验区四周设置保护行。试

验材料包括高感和抗病对照种，标准对照品种见附录B。

6.2人工接种

6.2.1室内苗期接种

在温室中，采用完全随机区组设计，设置3个重复，将待评价品种（系）种植于塑料方盒内，每个

塑料方盒内种植10个芽，试验材料包括高感和抗病对照种，标准对照品种见附录B。待甘蔗材料长到4

叶～5叶期时，使用无菌接种注射器吸取加入0.05%吐温20的100μL真菌悬浮液（1×106个/mL）在幼

苗基部叶鞘0.5cm