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ICS65.020.20B04
DB12
天津市地方标准
DB12/T885—2019
植物提取物中原花青素的测定紫外/可见分光光度法
DeterminationofpolysaccharideinLilyBulbus-UV/VISspectrophotometry
2019-03-25发布2019-05-01实施天津市市场监督管理委员会发布
I
DB12/T885—2019
前言
本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。
本标准起草单位:天津市农业质量标准与检测技术研究所。
本标准主要起草人:刘征辉、赵琳琳、魏静娜、张强、赵云平、薛天凯、徐石勇、郑贵忠。
1
DB12/T885—2019
植物提取物中原花青素的测定紫外/可见分光光度法
1范围
本标准规定了采用紫外/可见分光光度法测定植物提取物中原花青素含量的原理、试剂材料、仪器设备、分析步骤、分析结果表述和精密度。
本标准适用于植物提取物中原花青素的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
3原理
原花青素本身无色,但经过用热酸处理后,可以生成深红色的花青素离子,用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子,计算试样中原花青素含量。
4试剂和材料
4.1试剂
4.1.1甲醇(CH?OH)。
4.1.2正丁醇(CH?(CH?)?CH?OH)。
4.1.3盐酸(HCL):纯度为35%~37%(g/g)。
4.1.4硫酸铁铵(NH?Fe(SO?)2·12H?O)。
4.1.5水(H?O):GB/T6682规定的一级水。注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯。
4.2试剂配制
4.2.1盐酸-正丁醇溶液:取正丁醇50mL,于100mL容量瓶中,准确量取盐酸5mL,用正丁醇定容,摇匀,备用。
4.2.22mol/L盐酸溶液:准确量取盐酸20mL于烧杯中,加100mL水,摇匀,备用。
4.2.3硫酸铁铵溶液:称取硫酸铁铵2.0g于三角瓶中,加2mol/L盐酸溶液,放置于沸水浴中,至其全部溶解后,取出放置至室温,将其转移至100mL容量瓶中用2mol/L盐酸溶液定容至刻度。
4.3标准品
原花青素标准品纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
2
DB12/T885—2019
4.4标准溶液配制
4.4.1原花青素标准储备液(1.0mg/mL):取原花青素标准品10mg,精密称定,置10mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得浓度为1.0mg/mL标准储备液,溶液现用现配。
4.4.2原花青素标准系列工作液:准确量取原花青素储备液0.0mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL分别置于10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,的浓度为0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL的标准系列工作溶液。
5仪器和设备
5.1紫外分光光度计,配1cm比色杯,波长范围(110~900)nm。
5.2超声波提取机。
5.3涡旋混合仪。
5.4天平:感量0.01mg。
5.5具盖安瓿瓶:10mL。
5.6封口钳。
5.7容量瓶:10mL、50mL、100mL。
6分析步骤
6.1供试品溶液的制备
取样品(10~100)mg,精密称定,置50mL容量瓶中,加入30mL甲醇,超声处理(功率250W,频率50kHz)20min,放至室温后,加甲醇至刻度,摇匀,离心或放至澄清后取上清液作为供试品溶液。如样品原花青素含量较高,再精密量取上清液10mL,置100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
6.2测定
6.2.1标准曲线的绘制
准确吸取原花青素标准系列工作液各1mL,置于安瓿瓶中,精
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