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优化高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮

类药物残留情况-食品安全论文-社会学论文

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诺氟沙星(NOＲ)、恩诺沙星(ENＲ)、环丙沙星(CIP)、达氟沙星

(DAN)和沙拉沙星(SAＲ)为常见的氟喹诺酮类抗菌剂，目前在畜禽生产

中被广泛应用．此类药物使用不当导致的药物残留可能直接危害人

体健康，也可能使致病菌产生耐药性，间接对人类健康造成影响．多

个国家和地区均规定了氟喹诺酮类药物的最高残留限量．检测动物

源食品中氟喹诺酮类药物残留的方法有微生物法、酶联免疫法(ELISA)、

毛细管区带电泳法、电解分析法、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相

色谱－质谱联用法(HPLC-MS)等．目前，在鸡肉产品的检测中，常

采用的方法是《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测－高效液相

色谱法》(农业部1025号公告14-2008)．本试验以此标准为基础，

简化了试验前处理方法，优化了检测过程．经试验验证，该法非常

适合大批量处理样品，大量节省了处理时间和所需耗材，较大幅度降

低成本，方法的灵敏度和回收率均可满足我国现行兽药残留检测分析

的要求．

1材料与方法

1．1药品和试剂

恩诺沙星对照品、环丙沙星对照品、诺氟沙星对照品、达氟

沙星对照品、沙拉沙星对照品，均为中国兽医药品监察所产品，磷酸

二氢钾、磷酸、三乙胺、氢氧化钠溶液(分析纯，广州试剂厂)，乙腈(色

谱纯，Fisher公司)．

1．2仪器和设备

Agilent高效液相色谱仪(美国Agilent公司)配荧光检测器，

高速匀质机及振荡器(德国IKA公司)，高速台式冷冻离心机(美国

Thermo公司)．

1．3试液配制

分别称取恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星对照品各10mg，

置于同一个10mL容量瓶中，用0.05molL－1的氢氧化钠溶液溶

解定容至刻度，制得质量浓度均为1mgmL－1的混合储备溶液．准

确称取达氟沙星对照品10mg，0.05molL－1的氢氧化钠溶液溶解

定容至10mL，使其质量浓度为1mgmL－1．准确称取沙拉沙星

对照品10mg，0.05molL－1的氢氧化钠溶液溶解定容至10mL，

使其质量浓度为1mgmL－1．置2～8℃冰箱中保存备用，有效期1

个月．取上述恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星的混和储备液100L，

达氟沙星储备液20L，沙拉沙星储备液200L，置于同一个100mL

容量瓶中，用流动相定容至刻度，配置成恩诺沙星、环丙沙星、诺氟

沙星的质量浓度为1gmL－1，达氟沙星质量浓度为0.2gmL－1，

沙拉沙星质量浓度为2gmL－1的混合标准溶液．提取液:称取2g

三氯乙酸于容量瓶中，加水至100mL，制得的三氯乙酸溶液与乙腈

按体积比3℃1的比例混合，搅拌均匀，得到提取液．磷酸/三乙胺溶

液:取磷酸3.4mL，用水稀释至1000mL，配成0.02molL－1的磷

酸溶液，用三乙胺调pH至2.4．临用配制(易产生沉淀)．

1．4测定方法

1．4．1供试材料的制备将市售的鸡肉样品用高速匀浆机

绞碎得到供试试料，将空白鸡肉样品绞碎得到空白试料，在空白试料

中添加适宜浓度的标准溶液作为空白添加试料．

1．4．2提取与净化称取1g试料，置于匀浆杯中，加

提取液4mL，高速匀浆1min．匀浆液转入15mL聚丙烯离心管中，

振荡30min，16000r/min，离心8min，取上清液过0.2m滤膜，

装入进样瓶，待测．

1．4．3色谱条件色谱柱:AgilentTC-C18250mm4.6

mm(i．d)，粒径5m．流动相:V(0.02molL－1磷酸/三乙胺溶液)℃

V(乙腈)=80℃20．流速:1mLmin－1．检测波长:激发波长280nm;

发射波长450nm．进样量:20L．

1．5