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马人工授精技术规程(征求意见稿).docx

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T/XXXXXXX—XXXX

马人工授精技术规程

1范围

本文件规定了马人工授精过程中精液采集、品质检查、精液稀释、发情鉴定、输精、妊娠鉴定等的技术方法和要求。

本文件适用于马的人工授精。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

人工授精artificialinsemination

在人工条件下,利用器械将公马的精液采出,经过处理后(品质检查、稀释、保存等),再用器械将合格精液输送到母马生殖道内,使其受孕的一种配种方法。

3.2

种公马stallion

具有良好的体型外貌、完善的生长发育、肌肉强健、精液品质高、符合品种特征的健康公马。

3.3

母马mare

身体健康、发情周期规律、繁殖机能正常、达到适配年龄的未妊娠母马。

3.4

发情鉴定estrusidentification

综合利用外部观察法、直肠检查法和试情法等多种方法确定母马的发情状态。

4采精前准备

4.1采精场地

应设有采精室或固定采精场地,采精场地应宽敞平坦、安全卫生,配有清洗消毒设施、假畜台。

4.2设备器具

假阴道外壳、内胎应依次用洗洁精、2%碳酸氢钠溶液清洗,再用干净纱布遮盖晾干。采精前30min,用75%酒精棉球对假阴道内胎壁、集精杯内外璧由内向外消毒。

玻璃、金属器械等耐高温器械应用温水浸泡、洗净晾干后,再用干净纱布或白棉布包裹放置高压灭菌锅中消毒30min。

玻璃器械应用75%酒精浸泡消毒,待酒精挥发后方能使用;塑料及橡胶制品放置在距离紫外线灯下

60cm处照射灭菌30min以上。

凡与精液、马生殖器(道)接触的其他器具均应彻底洗净后严格消毒,再用稀释液冲洗后使用。

4.3台马

选择健康无病、性情温顺、营养中等膘情发情母马为台马,保定并用绷带布包扎马尾并系于马体左侧,台马外阴部用0.1%高锰酸钾溶液清洗消毒,用消毒纱布或毛巾擦干。

4.4种公马

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种公马阴茎及包皮宜用1%来苏尔消毒液消毒,温水冲洗干净后用消毒纱布擦干。

5采精

5.1假阴道的安装

5.1.1安装内胎

假阴道外壳两端应光滑,将内胎放入外壳,使内胎露出外壳两端的部分等长,后将内胎翻转套在外壳上,内胎平整无扭曲,用橡胶圈固定两端。

5.1.2注水

在气阀口向假阴道内胎夹层灌入1500ml~3000ml温水,水量宜为外壳与内胎间容量1/3~1/2。

5.1.3涂润滑剂

在假阴道入口前1/3段,用玻璃棒均匀涂抹5ml灭菌甘油。

5.1.4充气调压

内腔充气压力视公马阴茎的粗细、长短调整,内胎呈“Y”或“X”字型,入口宜为较浅的漏斗状。

5.1.5测温

用水温计伸入假阴道中间部位,测量温度,宜为38℃~40℃。假阴道入口端用消毒纱布盖好,装入保温箱内备用。

5.2采精

采精员穿防护服,双手清洗消毒后戴橡胶手套,右手持假阴道把柄并靠在右臂肘处,站于台马右后侧,调整假阴道角度使之与公马阴茎伸出方向一致,左手托住阴茎基部使其自然插入假阴道。公马射精完毕后,将假阴道的集精杯端放低并打开活塞放气,充分排精后,缓慢将假阴道竖起并移开,将精液及时送至处理室。

6精液品质检查

6.1外观检查

精液品质检查在20℃~25℃室温条件下进行。取下集精杯,用4层无菌纱布或专用滤网过滤,读取精液量,正常射精量应在40ml~70ml之间。检查色泽、气味,正常新鲜精液应为淡乳白色或灰白色,有特殊腥味。异常精液应废弃

6.2显微镜检查

6.2.1活率

检查时显微镜载物台温度应保持37℃~38℃,用移液器取原精液,滴在洁净的载玻片上加盖玻片,在显微镜下放大400倍对精液样品进行观察,每个演片不少于3个视野,上下调节旋钮,观察不同层次内的精子运动情况,求其活力的平均值。视野中估算直线前进运动精子数所占全部精子的百分数,直线前进运动的精子为100%者评为1.0,90%者为0.9,以此类推。新鲜精液活率≤0.7时应废弃。

6.2.2密度

用移液器取原精液,滴在洁净的载玻片上加盖玻片,显微镜放大100倍观察。视野内精子彼此之间空隙小于一个精子的长度,评为“密”;视野内精子彼此之间空隙约为一个精子的长度,评为“中”;视野内精子彼此之间空隙大于一个精子的长度,评为“稀”。精子密度≤1×109/ml应废弃。

6.2.3畸形率

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用移液器取原精液,滴在洁净的载玻片上加盖玻片,显微镜放大200倍~400倍观察畸形精子数,计算畸形精子的百分率。精子畸形率≥10%时应废弃。

6.2.4存活时间

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