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由上式可知,在相关参数确定后,根据射线的能量,可定性核素,根据射线强度的测量可由上式求得含量,这种方法称为绝对测量,为了避免相关参量测量的繁杂和不确定性,常采取相对测量。相对测量待测样品和该元素含量已知的标准在相同条件下活化和测量,此时:式中,x-待测样品,s-标准。特点非破坏性、多元素(周期表几乎所有元素)同时分析,灵敏度高(10-6-10-10),准确度高(1%)。PART01添加标题活化分析的干扰反应此处的干扰是指活化过程本身可能产生的干扰反应。添加标题样品中不同元素可能通过不同核反应产生同一种被鉴定的核素,如这类干扰无法在探测中排除,但通过选择中子能量或活化前作必要分离,可尽量减少干扰。在热中子活化时,因,(n,p)反应截面远小于(n,r)的,问题并不严重,但在快中子活化时,应考虑是否存在干扰。其它核素被活化产生能量相近的射线,这种干扰可利用核素的半衰期不同,选择适合冷却时间,或采用高分辨率探测器将它们区分开来。分析设备和辐照条件选择活化的设备主要有,辐照中子源,样品传送及放化分离设备,射线探测和分析设备。辐照源有:反应堆、同位素中子源(如,Ra-Be)、裂变中子源(中子管)和加速器。同位素中子源体积小,便于携带;反应堆中子通量最大,尤其是高通量的热中子,其反应截面大,分析灵敏度高,可供分析元素多。中子管主要用于野外作业。样品辐照条件选择反截面大,干扰反应小的中子反应类型,以生成放射性核素的半衰期和射线能量适合的核素,辐照时间一般为放射性核素的2-3个半衰期,中子通量视反应截面和元素含量而定,样品一般采用气动传送管道送到辐照部位,再由辐照部位传到测量部位,探测信号通过电缆送到分析仪上。这样既可避免高剂量对人的危害,又可进行短半衰期核素的测量。现在探测器多为高分辨的Ge(Li)探测器。2.饱和曲线对与一定数量([RT])固定)和一定亲合力(Kd固定)的受体,随配基浓度上升,培基结合物RL先快后慢上升,最后达到饱和,所有受体都被结合。1.质量作用定律式中,[R],[L]为游离受体和配基的浓度,[RL]为复合物浓度。Scatchard作图重排:得著名的Scatchard函数当RT和Kd固定,[RL]/[L]---[RL]是线性关系,其斜率为1/Kd,即亲合常数的倒数,横截距为RT,即受体数量。Hill函数及系数若受体有多于1个以上的配基结合位点,则上式直线的斜率称为Hill系数。若受体:配基=1:1,则n=1;若受体:配基=1:2,则n=2。非放射性碘标记---电感耦合等离子体质谱免疫分析体系以非放射性127I为标记原子,采用溴代琥珀酰胺(NBS)法,对含有络氨酸残基的抗原或抗体进行标记,制得127I标记抗体或抗原。免疫反应测定时,将结合的标记物与游离的标记物分离后,用用稀氨水溶液将碘洗脱并经ICP-MS检。该体系标记反应步骤简便,标记率高、标记物稳定、活性好,无放射性危害。同时,用ICP-MS检测,尽管卤素的电离电位较高,但碘的第一电离能为10.45eV,在氩等离子体中只能达到大约25%的电离,和其他分析方法相比,还是具有比较高的灵敏度。?参考文献:李景喜等.非放射性碘标记一电感耦合等离子体质谱用于免疫分析研究.植物生态学报,2010,34(2):170–178非放射性标记免疫分析技术酶联免疫分析(enzymeimmunoassay,EIA)用酶作为标记物标记抗原(抗体),以酶促底物反应产物的颜色作为检测信号的免疫分析方法。酶及底物:辣根过氧化酶—邻苯二胺碱性磷酸酶—P-硝基酚磷酸盐测定模式:竞争性非竞争性单击此处可添加副标题单击此处添加大标题内容免疫分析类型(用途,分离及分析技术)免疫测定均相(Ab-AgE酶活性改变,与AgE相区分)(不分离F与B)液相(EIA)非均相标记抗原类型(分离F与B)固相(ELISA)标记抗体光镜水平免疫组化电镜水平酶标测定简便,使用范围较广,但因酶反应对环境条件敏感,定量性较差。非均相液相法非均相固相法(固定抗原)均相酶标抗原PART1化学发光免疫分析(chemicalluminescentimmunoassay,CLIA)用某些发光物质标记抗原(抗体),当其被氧化时,可被化学反应激发而发光,以其发光作为检测信号的免疫测定法。直接化学发光物质标记法标记物为吖啶脂,该类化合物结构上都有吖啶环,在过氧化氢阴离子(HO-2)作用下,形成电子激发态中间体N-甲基吖啶酮,其退激是放出?=395nm,430nm的光子。酶标
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