血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定作业指导书.pdfVIP

志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟

血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定作业指导书

1.实验原理

VITROSLDH试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合

物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。本法测LDH

+

采用丙酮酸和NADH作底物以产生乳酸和NAD。

将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分

布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。乳酸脱氢酶

+

催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD。用反射强度变

化测出NADH的氧化率，再将其转化成乳酸脱氢酶的活

力。

测定方式：速率法

波长：340nm

测试时间和温度：37℃约5分钟

反应过程：

LDH

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+

丙酮酸+NADH+H———————→乳酸

+NAD

2.标本：

2.1病人准备：无特殊。

2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。

2.3标本采集与处理：

Vitros测试血清和血浆的结果是一致的。而其它

一些方法由于在低速离心时血浆中血小板造成的污

染，会使血清和血浆的测试结果有明显差异。由于

VitrosLDH干片对完整血小板内的LDH不敏感，因此

对比方法的LDH结果会与Vitros肝素抗凝血浆的测试

结果不一致。样品采集后1小时内离心，然后吸出血

清。处理样品时要将其当成生物污染品。

3.标本的存放：血清、血浆室温下最多2天；不可

冷冻保存。

4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染

和蒸发。

志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟

5.标本拒收的标准：污染、溶血标本不能使用。

6.试验材料：

6.1测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物

Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。

强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了

测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。

6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是NADH和丙酮

酸钠。其它成份有聚合物颗粒，粘合剂，缓冲剂，表

面活性剂，聚合物交叉连接剂和稳定剂。干片标记：

试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，

有效期限和储藏温度。

6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片

盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其

达到室温状态18～28℃。因此从冰箱中取出的试剂盒

至少要在室温下要放置60分钟，而