实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量.doc

实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量

一、实验目的

1．学会使用紫外-可见分光光度计，掌握标准对比法。

2．掌握标准对照法曲线的绘制和含量的计算。

二、实验原理

在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。

三、实验器材

试药：0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸

仪器：量瓶、烧杯、紫外-可见分光光度计

四、实验步骤

1、苯甲酸标准储备液的制备

精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。

2、苯甲酸吸收曲线的测量

吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。此溶液1ml含8μg苯甲酸。

测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长范围：210～240nm。

3、标准曲线的制备

取标准储备液适量，置于50mL容量瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠稀释，分别得到浓度为4、8、12、16、20、24μg.L-1的溶液，取各溶液于“2项”曲线中的最大吸收波长处测吸收度A，得回归方程和相关系数R2。

4、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量

取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。

在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。以0.01mol/L氢氧化钠溶液为参比。在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。

5、按“3项”所得回归方程计算样品液中苯甲酸的浓度。

五、数据处理

样品液中苯甲酸含量

吸光度

含量（mg/ml）

标准溶液

待测溶液

苯甲酸吸收曲线的绘制

浓度C（mg\ml）

吸光度A

绘制标准曲线。

试样溶液的吸光度为,从标准曲线上可查得c=mg/ml。

六、思考题

1、如果试液测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办？

2、从实验测出的吸光度求苯甲酸含量的根据是什么？如何求得？