DB12T 838-2018 辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法　　.pdfVIP

ICS65.020.20

B04

DB12

天津市地方标准

DB12/T838—2018

辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法

MethodofidentifyingseedpurityofpepperbyusingSSR-basedmarker

2018-11-07发布2018-12-01实施

天津市市场和质量监督管理委员会发布

DB12/T838—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由天津市农村工作委员会提出并归口。

本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、天津市蔬菜研究中心、黑龙江省农业科

学院农产品质量安全研究所。

本标准主要起草人：兰青阔、吕敬刚、赵新、王成、兰璞、焦荻、高素燕、陈锐、关海涛、张耀中、

焦贺敏。

I

DB12/T838—2018

辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法

1范围

本标准规定了辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定方法的原理、仪器设备及试剂、方法步骤、纯度计算。

本标准适用于辣椒单交种的纯度鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标

准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

种子纯度seedpurity

种子在SSR分子标记带型方面典型一致的程度，用具有本品种特异带型的种子粒数占鉴定样品种子

粒数的百分率表示，以反映某品种特征特性的一致性程度。

3.2

聚合酶链式反应polymerasechainreaction(PCR)

一种在体外通过酶促反应扩增特异DNA片段的技术。

3.3

简单重复序列simplesequencerepeat(SSR)

由几个核苷酸(1～6个)为重复单位聚集而成的长达几十个至几百个bp(一般为100～200)的串联

重复序列，又称微卫星序列或短串联重复序列，其高度多态性主要来源于串联数目的不同。

3.4

分子标记molecularmarker

以蛋白质、核酸分子的多态性为基础，鉴定生物在遗传上的差异。

4原理

SSR分布于辣椒整个基因组，每个位点上重复单位的数目不同造成了品种间的多态性，利用PCR技术

将多态的SSR扩增出来，通过电泳检测扩增产物，利用电泳图谱进行辣椒种子纯度鉴定。

5仪器设备及试剂

1

DB12/T838—2018

5.1仪器设备

PCR仪；测序电泳槽；水平电泳槽；高压电泳仪(3000V,400mA,400W);万分之一电子天平；

微量加样器；磁力搅拌器；台式离心机；紫外-可见成像系统；胶片观察灯；水平摇床；高压灭菌锅；

pH计等。

5.2试剂

乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2);三羟甲基氨基甲烷(Tris);盐酸(HC1,36%);十二烷基硫酸

钠(SDS);氯化钠(NaC1);氢氧化钠(NaOH);硼酸；去离子甲酰胺；