2025年酵母样真菌 ROSCO 法药敏试验标准操作程序.pdfVIP

长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。——李白

酵母样真菌ROSCO法药敏试验标准操作程序

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正确进行酵母样真菌ROSCO法药敏试验操作，监测耐药性酵母菌的出现及

其耐药性变化，为酵母样真菌治疗提供参考依据。

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将含有定量抗真菌药物的药片贴在已接种待测菌的琼脂平板，药片所含药物

吸收琼脂上水溶解后向周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，待测菌生长被抑

制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映了待测菌对测定药物的敏感性，根

据厂家提供的药敏试验判读标准，判断抗真菌药物的体外敏感性。

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3.1培养基：采用FMH琼脂，同时添加氯霉素控制细菌的污染。厚度严格控制

为4cm。

3.2接种液的配置：

3.2.1接种液的配制中，浓度的控制是最为重要的，接种液过浓会导致比咯类/咪唑

类抑菌圈判读困难，而出现假阴性结果。

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3.2.2对于大多数的菌株，接种浓度为5*10CFU/ml(先配0.5麦氏浊度，再用生理

盐水1：1稀释)；

3.2.2.1对于克柔氏念珠菌(C.krusei)，先配0.5麦氏浊度，再用生理盐水1：10

稀释；

3.2.2.2对于隐球菌属(Cryptococcus)，先配1.0麦氏浊度，无需稀释。

3.2.3接种前，平板先置于35℃干燥20-25分钟。对于9cm平皿吸0.5ml接种液

，14cm吸1.0ml接种液，倾注于平板表面，涂布均匀，用移液管吸走多余液体。

然后，平板在35℃干燥10分钟，帖药片。最终要求，在琼脂表面，菌落恰呈合

生长。

3.3培养条件：在多数情况下，应在35℃培养18-24小时后马上测量抑菌圈，

因为培养时间过长会导致假耐药，特别是对于咪唑/吡咯类药物。即培养过夜后应

子曰:“知者不惑，仁者不忧，勇者不惧。”——《论语》

检查平板，如果抑菌圈清晰，应该马上测量。如果对于某些菌株在培养过夜未见生

长，那么应该再多培养24小时。而对于隐球菌属在30℃培养42-48小时。

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严重系统性感染株判读标准

抑菌圈直径(mm)Breakpoints，MICug/ml

药物名称敏感中介耐药敏感耐药

两性霉素B/10ug≥1514-10＜10≤1≥4

氟康唑/25ug≥22≤14≤8≥64

21-15

氟胞嘧啶/1ug≥20≤11≤4≥32

19-12

氟胞嘧啶/10ug

≥30≤22≤4≥32

19-23

伊曲康唑/8ug

≥16≤9≤0.12≥1

15-10

酮康唑/1ug