生物反应器工艺研究参考.pdfVIP

2.1.3.7L5L生物反应器工艺研究

1)实验目的

经过摇瓶培养和微型生物反应器Ambr的工艺条件研究实验，初步确定了

工艺参数以及其对细胞生长、抗体产量和质量的影响。在此基础上，我们在利

用7L和5L生物反应器对工艺条件进行了进一步研究和放大。

2)实验设计

先后进行了2批实验，实验的条件设计见表2-7所示，2罐分别测试了不同

厂家补料FeedC+（2*）和YPFeed2的表现，并且5L和50L生物反应器放大

实验平行进行，以评价放大的可比性。

实验代号B7-16B5-17

细胞31-2G2-31C4-4P/200M

66

接种密度1×10cell/ml1×10cell/ml

Day0-4:37.0℃;

温度

Day4-21:35.0℃

溶氧50%

pH7.0±0.1

搅拌转速150rpm150rpm

基础培养基YP+Gln(6mM)

补料培养基FeedC+(2*)YPCellTurboFeed2+40mMN-

Acytl-D-Glucosamine+30uM

MnCl2

补料速率系数75

葡萄糖补加至3g/L

培养时间1114

表2-1：7L5L生物反应器实验设计表

3)实验结果

①细胞生长

从活细胞细胞密度曲线（图2-2）上看B5-17细胞0-8天细胞快速生长，密度

生长至1.4e6后降低，B7-16细胞0~11天逐渐增长后降低，从图谱上看，采用

YPCellTurboFeed2+40mMN-Acytl-D-Glucosamine+30uMMnCl2的实验组B5-17的密

度比采用FeedC+(2*)的B7-16要高，说明YPCellTurboFeed2+40mMN-Acytl-D-

Glucosamine+30uMMnCl2要比FeedC+(2*)更有利于细胞的生长。比较细胞活率（图

2-3），B5-175L罐0~8天细胞活率在98%左右，第9天活率开始下降，第11

天收获时活率为80.9%；7L罐0~3天活率维持在97%左右，4~