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关键词:线粒体,MPTP,Calcein,荧光
技术类文章飞跃的载体
难点逐一击破,这么好的试剂盒谁不拥有我都会伤心的OK
曾经遇到一个做药物毒性研究的同学,
细胞的药物暴露多种前期工作都做得很好,
可是有一天
导师找到他,说:
你可以在常规实验基础上再拔高一点,
深入到细胞器和遗传物质水平的研究。
同学瞬间EMO:
手上经费有限,
细胞器研究的常规设备电镜没有配齐,
遗传物质分子水平的研究以前没有做过,
那怎么办?
有没有几款检测设备常规,操作简便的实验工具可以解决同学的燃眉之急呢?
Abbkine线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒,线粒体通透性转换孔的开放是引起细胞死亡的关键事件,在细胞的生存和凋亡的调控过程中扮演着重要角色!
Abbkine彗星试剂盒检测细胞的DNA损伤,不仅步骤更简便,省时高效,且荧光较亮,样本不易脱落,可形成稳定鲜亮的结果!
产品详情
货号
名称
运用
规格
价格(元)
KTA4002
线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒
细胞线粒体检测
50T/100T
798/1398
KTA3040
彗星法DNA损伤分析试剂盒(3孔载玻片)
细胞DNA损伤检测
15T/75T
1398/2198
初步接触这两个试剂盒,同学可能会有很多疑问,下面我们对同学的疑问进行逐一击破:
第一部分线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒
Q:该试剂盒如何检测MPTP开放程度?
A:本方法比基于线粒体膜电位的方法能更直接地检测到线粒体通透性转换孔开放程度的变化,根据线粒体中Calcein绿色荧光的强弱来判断线粒体MPTP开放的程度,绿色荧光越强,开放程度越低,绿色荧光越弱开放程度越高。实验需要设置阴性对照和阳性对照进行比较,没有灵敏度和检测限数据,荧光显微镜、流式均可检测。
Q:该试剂盒阴性对照和阳性对照如何设置?
A:阴性样本中加入CalceinAMstainingsolution;阳性样本中加入Ionomycincontrol。
Q:该试剂盒染色之后是否可以用DAPI染核呢?
A:如果染核推荐Abbkine的Hoechst33342活细胞染料(BMD0062)。不可固定。
Q:组织或线粒体样品可以检测?
A:组织的单细胞悬液可以尝试。提取出来的线粒体不适合。
Q:该试剂盒应该选用哪个通道进行检测?
A:选用FITC/488nm激发光通道进行检测。
Q:该试剂盒目前检测的样本类型有哪些?
A:本试剂盒可以对贴壁细胞和悬浮细胞都进行检测,包括:L929Jurkat等细胞。
彗星法DNA损伤分析试剂盒(3孔载玻片)
Q:该试剂盒的实验流程是怎样的?
A:该试剂盒的大体步骤如下:
Q:如何防止琼脂糖凝胶从载玻片上脱落?
A:彗星玻片经过化学处理,表面带有粘性,可吸附琼脂糖。琼脂糖从玻片上脱落,主要是因为琼脂糖-细胞混合液添加到玻片孔上时,未完全覆盖。必须保证琼脂糖凝胶完全覆盖在孔上,另外玻片始终保持水平状态也很重要。
Q:彗星玻片三个孔可以分批使用吗?是否可以重复使用呢?
A:可以分批使用,未使用的孔用酒精擦拭干燥之后可以继续使用。不能重复使用,彗星玻片表面经过了特殊处理,一旦整个玻片经历了变性,电泳和洗涤的操作步骤,就不能再重复使用了。
Q:该彗星分析试剂盒适合用哪种电泳仪?
A:该彗星分析试剂盒可用于任何水平电泳槽,不限于任何特定型号,但不能使垂直电泳仪。
Q:如何防止琼脂糖凝胶从载玻片上脱落?
A:彗星玻片经过化学处理,表面带有粘性,可吸附琼脂糖。琼脂糖从玻片上脱落,主要是因为琼脂糖-细胞混合液添加到玻片孔上时,未完全覆盖。必须保证琼脂糖凝胶完全覆盖在孔上,另外玻片始终保持水平状态也很重要。
Q:彗星玻片三个孔可以分批使用吗?是否可以重复使用呢?
A:可以分批使用,未使用的孔用酒精擦拭干燥之后可以继续使用。不能重复使用,彗星玻片表面经过了特殊处理,一旦整个玻片经历了变性,电泳和洗涤的操作步骤,就不能再重复使用了。
Q:该彗星分析试剂盒适合用哪种电泳仪?
A:该彗星分析试剂盒可用于任何水平电泳槽,不限于任何特定型号,但不能使垂直电泳仪。
Q:如何避免Agarose发生凝胶化?
A:对于多个样品,将细胞样品与Agarose混合液保持在37℃以避免凝胶化。
Q:如何避免Agarose发生凝胶化?
A:对于多个样品,将细胞样品与Agarose混合液保持在37℃以避免凝胶化。
这两款试剂盒均具有试剂齐全,操作简便,实验结果可靠的特点,符合科研工作者的实验需求。欢迎广大“蝌蚪”多多关注Abbkine公众号,还会有更多科研惊喜等着大家哟。同时,Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台,经过不懈努力,将多种高端生物实验的干货整理出来,后期陆续在微信公众号中刊登,请广大热爱科
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