DB22T 3679-2024普通级实验用猫 体内胚胎生产操作规程.docx

ICS65.020.30CCSB44

22

吉林省地方标准

DB22/T3679—2024

普通级实验用猫体内胚胎生产操作规程

Operationproceduresforinvivoembryoproductionofconventionalexperimentalcat

2024-12-31发布2025-02-10实施

吉林省市场监督管理厅发布

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省科学技术厅提出并归口。

本文件由吉林省科学技术厅组织实施。本文件起草单位：吉林大学。

本文件主要起草人：俞先峰、袁宝、任文陟、张明军、陈健、刘殿峰、张嘉保、金永勋、权福实。

普通级实验用猫体内胚胎生产操作规程

1范围

本文件确立了普通级实验用猫体内胚胎生产技术流程，规定了普通级实验用猫体内胚胎生产过程中供体的选择与饲养管理、供体的超数排卵与人工授精、手术法胚胎采集与胚胎质量鉴定等操作指示，描述了记录与档案的追溯方法。

本文件适用于普通级实验用猫体内胚胎生产操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB14925实验动物环境及设施

DB22/T2591普通级实验用猫病原微生物监测3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4技术流程

普通级实验用猫体内胚胎生产技术包括供体的选择与饲养管理、供体超数排卵与配种、手术法胚胎采集与胚胎质量鉴定。猫体内胚胎生产技术流程见图1。

2供体的超数排卵与配种（见第6

2供体的超数排卵与配种

（见第6章）

1供体的选择与饲养管理

（见第5章）

3采胚及胚胎（见第7

质量鉴定章）

4记录与档案

4记录与档案（见第8章）

图1技术流程图

5供体的选择与饲养管理

5.1选择

供体应满足以下条件：

a)体质健壮，生殖机能正常，遗传性能稳定，三代系谱完整；

b)微生物质量符合DB22/T2591要求。

5.2饲养管理

供体的饲养环境应满足GB14925要求；超数排卵前3周～5周应加强饲养管理，可适量补充维生素和微量元素。

6供体的超数排卵与配种

6.1超数排卵

6.1.1试剂

促卵泡激素（FSH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）、生理盐水等。

6.1.2超数排卵方法

供体猫每隔12h，分三天递减注射，15U、15U、10U、10U、5U、5U的促卵泡激素,连续注射6次，第四天注射200U的人绒毛膜促性腺激素。

6.2配种

6.2.1种公猫的要求

6.2.1.1体质健壮，生殖机能正常，精液质量良好。遗传性能稳定，三代系谱完整；

6.2.1.2微生物质量符合DB22/T2591要求。

6.2.2自然交配

注射促人绒毛膜促性腺激素后立即放入种公猫进行交配，公猫和母猫交配时应提供安静的环境。

6.2.3人工授精6.2.3.1器械

腹腔镜、输精枪、输精套管、恒温水浴锅、猫手术台、兽用电动剃毛刀等。6.2.3.2精液质量要求

精子活力70%以上，畸形率少于20%。6.2.3.3精子采集

利用发情母猫做台畜采集种公猫精液，符合6.2.3.2要求的精液浓度调至每毫升2000万个精子。6.2.3.4输精

术前12h禁食，全身麻醉后仰卧在手术架上，手术部位备皮消毒。在距离最后一对乳房前1cm、腹中线2cm～3cm的左侧和右侧位置，分别用手术刀切开2mm小口，用腹腔镜观察卵巢排卵情况，发现排卵后用输精枪每侧子宫腔输入不少于0.5×107个精子。

7采胚及胚胎质量鉴定

7.1冲胚步骤

7.1.1器械及药品

器械：猫手术台、保定绳、兽用电动剃毛刀、手术器械、冲胚管、平皿（60mm、100mm）、恒温水浴锅等。药品：75%酒精、碘伏、生理盐水、抗生素、麻醉药、冲胚液等。

7.1.2胚胎采集时间及部位

配种或人工授精24h～72h从输卵管采集1细胞期～8细胞期胚胎，配