实验一细菌形态学检查.ppt

实验一细菌形态学检查1进入实验室必须穿白大褂，离室时脱下反折；无菌操作时必须戴口罩。2不必要物品勿带入实验室，必要的文具、实验指导和笔记本应放在指定的操作区。3实验室内禁止带入饮食，抽烟，不得高声谈笑或随便走动。4需培养的物品应做好标记放在指定地点。用过的有菌器材必须放在消毒缸内，小心处理传染材料、培养物和污染的物品。5避免任何有菌材料的溅出，若不甚污染工作台、手、眼、衣服和地面等处，应立即报告老师及时适当处理。6实验完毕后物归原处，并清洁桌面；肥皂洗手、消毒液浸泡洗净后，关闭水、电、煤气和门窗方可离开实验室。生物安全0102030405握临床微生物实验室规则，生物安全及其它注意事项。握显微镜油镜的使用和保护。悉显微镜的结构和各部分的功能。染色和各种染色标本的显微镜观察。菌特殊结构的染色与观察。【实验目的】光学显微镜的使用不染色标本的检查细菌特殊结构染色和观察革兰氏染色和细菌基本形态观察【实验内容】细菌鉴定的重要手段，有助于细菌的初步分群是决定采用何种生化反应的重要提示初步诊断01淋球菌涂片03结核涂片02形态学检查的意义先用低倍镜找出标本位置，再转用油镜香柏油的作用：玻片和空气密度不同，使部分光线经空气折射后不能进入透镜，而香柏油的折光率与玻璃相近，可使进入油镜的光线增多，视野光度增强，物像清晰粗调+微调镜头要保持清洁（可用二甲苯擦拭镜头）2341显微镜的使用染色标本检查法不染色标本检查法特殊染色检查法形态学检查的方法压片法（压滴法）不染色标本检查法1用接种环分别取细菌2~3环，置于洁净载玻片中央轻轻覆上盖玻片油镜下观察不染色标本检查法2悬滴法固定：杀死细菌;使菌体与玻片粘附;菌体蛋白变性易着色涂片：染色：革兰染色镜检干燥：室温自然干燥染色基本步骤：染色标本检查法革兰染色-基本步骤染：结晶紫1min；1染：碘液1min；2色：95%乙醇无紫色脱落为止；3染：石碳酸复红30s，自然干燥后镜检4结果判断：紫色为革兰阳性菌、红色为革兰阴性菌注意事项：涂片不宜过厚固定不宜过热脱色是关键：脱色不够：革兰阴性菌革兰阳性菌脱色过度：革兰阳性菌革兰阴性菌18~24h菌龄最佳已知金葡与大肠作为阳性和阴性对照革兰染色-结果与注意事项01鞭毛染色02芽胞染色03荚膜染色特殊染色（示教）鞭毛染色-套组内容及规格内容规格主要成分复红酒精溶液(A液)20ml品红鞣酸水溶液(B液)20ml鞣酸钾明矾溶液(C液)20ml钾明矾工作液过滤瓶工作液2~8℃约可保存2~3天根据使用量将A液、B液、C液等比例混合，并置于工作液过滤瓶内，混合均匀静置2h后方可使用鞭毛染色-工作液配制鞭毛染色-玻片的处理鞭毛染色成功与否，与玻片的洁净度有非常密切的关系取新的载玻片，先用洗洁精清洗干净后，再浸泡在3%盐酸酒精2天以上，使用时从酸性酒精中取出，并用纯水冲洗干净，再以干净纱布擦干或自然干燥后使用