微生物蛋白酶的分.pptVIP

金属蛋白酶：X射线晶体结构分析得出，其活性依赖于一个二价金属离子（通常是锌离子）结合到His-Glu-Xaa-Xaa-His基团。金属蛋白酶活性可因透析或加入螯合物而失掉。半胱氨酸蛋白酶：植物中木瓜蛋白酶被认为是半胱氨酸蛋白酶的原始类型和这类酶的很好例子。它们催化肽，巯基酯和硫羰基酯键的水解。水解机制与丝氨酸蛋白酶非常相似。Ingeneral,extracellularproteasescatalyzethehydrolysisoflargeproteinstosmallermoleculesforsub-sequentabsorptionbythecellwhereasintracellularproteasesplayacriticalroleintheregulationofmetabolism.蛋白更新：例如大肠杆菌中，ATP依赖性蛋白酶负责非正常蛋白的水解。真核生物胞内蛋白酶的更新也受到ATP依赖性蛋白酶的影响。五.蛋白酶的生理学功能芽孢和孢子释放：用蛋白酶抑制剂证实芽孢形成需要蛋白酶。提高蛋白酶A的活性与酵母二倍体子囊孢子的形成有关。休眠孢子的萌发：休眠孢子中，丝氨酸内肽酶降解蛋白质生成的氨基酸和氮为新蛋白质和核苷酸类的生物合成提供原料。酶的修饰：许多蛋白酶是以酶原的形式存在。Kex-2蛋白酶是真核酶前体加工处理的典型。通过特异性裂解羧基末端残基对，催化激素原和分泌途径的完整膜蛋白的水解。肠激酶胰蛋白酶原————————胰蛋白酶胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶原—————胰凝乳蛋白酶疏水氨基酸存在下胃蛋白酶原——————————自我催化为胃蛋白酶胃蛋白酶激活或自我催化凝乳酶原——————————————凝乳酶细胞营养：蛋白酶水解较大肽链为小肽和氨基酸，有助于被细胞吸收。胞外酶由于脱聚合化活性在细胞营养中占重要作用。基因表达调控：ATP依赖性蛋白酶有新的生理学功能，可作为蛋白分子伴侣，介导蛋白水解，蛋白络合物的分解和聚合化。此外，蛋白酶还介导许多调节蛋白的分解。基因工程—基因工程微生物—目的：提高产量，阐明结构，蛋白工程。01细菌02芽孢杆菌属：一些芽孢杆菌属分泌两种主要的工业用蛋白酶，即枯草杆菌蛋白酶（碱性蛋白酶）和金属蛋白酶（中性蛋白酶）。03枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属蛋白酶基因克隆的宿主。04六.微生物蛋白酶的基因改造MolecularandBiotechnologicalAspectsofMicrobialProteases汇报人：马纳纳2012年9月20日PROTEASES来源分类应用01动力学机制生理学功能02基因改造蛋白质工程序列同源性及进化关系03蛋白酶来源广，数量多，用途广。01根据蛋白酶来源，可将其分为植物蛋白酶（PlantProteases），动物蛋白酶（AnimalProteases），微生物蛋白酶（MicrobialProteases）。03蛋白酶是重要工业酶之一，约占世界范围酶总量的60%。02一.蛋白酶的来源PlantProteases木瓜蛋白酶Papain(最适pH5~9)菠萝蛋白酶Bromelain(最适pH5~9）角蛋白酶Keratinases（降解毛发等）AnimalProteases胰蛋白酶Trypsin（丝氨酸蛋白酶，水解lys，arg羧基形成的肽键）胃蛋白酶Pepsin（最适pH1~2，水解位点在两个疏水氨基酸之间）凝乳酶Rennin(类似胃蛋白酶，特异切割k-酪蛋白的单一肽键）糜蛋白酶Chymotrypsin（水解phe，try，tyr羧基形成的肽键）MicrobialProteases细菌蛋白酶真菌蛋白酶病毒蛋白酶010203主要为芽孢杆菌属产生的酸性和碱性蛋白酶。中性蛋白酶最适pH5~8，耐热性相对较低。一些中性蛋白酶是金属蛋白酶，其活性需金属二价离子；而一些是丝氨酸蛋白酶，不受螯合物影响。碱性蛋白酶最适pH为碱性，有很宽的底物特异性。广泛用于洗涤工业。细菌蛋白酶真菌产蛋白酶多于细菌。eg：Aspergillusoryzae（米曲霉）产生酸性，中性，碱性蛋白酶。但是真菌蛋白酶的反应速率和耐热性都低于细菌。中性蛋白酶是金属蛋白酶，在pH为7时有活性，可被螯合物抑制。用于食品行业中蛋白脱苦。酸性蛋白酶最佳pH4~4.5，用于奶酪制作行业。碱性蛋白酶也用于食品中蛋白的改造。真菌蛋白酶已经发现多种病毒中含ser，asp，cys蛋白酶。主要