医学硕士研究生开题报告范文3.ppt

;;五、预期目标

六、已具备条件和个人条件

七、前期工作基础（可行性）

八、研究工作的主要阶段、进度和完成时

间

九、经费预算

十、实验风险及前景分析;;;三立论依据和国内外研究现状

1.脊髓损伤严重威胁人们的健康和生活质量，被视为临床治疗的难题。脊髓损伤后的修复一直是神经科学研究领域的一大难题。近年来神经干细胞的发现及其相关研究为脊髓损伤的治疗提供了一种新的策略。;;;;;2.胶质细胞是神经系统中除神经元外的另一类细胞成分。数量上胶质细胞远多于神经元，有报道CNS内胶质细胞与神经元的数目之比为10：1～50：1。星形胶质细胞约占正常成人中枢神经系统细胞总数的40％。星形胶质细胞在中枢的作用不仅仅是保护、营养和支持，还参与血－脑屏障的;构成、水的转运、递质的代谢和释放、离子平衡的维持等[6~8](VanDcGraaff,1998;SulyoklE,2004;朱长庚.神经解剖学)。胶质纤维酸性蛋白（glialfibrillaryacidicprotein，GFAP）是构成神经胶质细胞的主要细胞骨架蛋白，其表达的高低可以反映胶质细胞的功能状态[9](BiginiP,2001)。;;;很多研究表明PCD存在于神经系统发育的多个环节[11](NaruseI,1995)，从未分化的神经上皮到迁移后的有丝分裂后细胞，从神经管的形成[12](李泽桂,1999)到神经元与靶区的匹配都有PCD发生，凡不能与靶区正确匹配和参与正常神经网络形成的神经元均通过PCD加以清除[13](HommaS,1994)。;;;Nestin、NeuN、GFAP抗体

Nestin：Chemicon公司（批号MAB5326)

NeuN：Chemicon公司（批号MAB377）

GFAP：Upstate公司（批号07－650）

－20℃冰箱保存，稀释后4℃保存

PV－9000免疫组化试剂盒

厂家：中杉公司

Lot:50910

2-8℃保存;DAB显色液（ZLI-9032）

批号：1386184

2-8℃保存

PBS缓冲液

柠檬酸盐修复液

TUNEL－POD试剂盒

厂家：Roch公司

批号：;4.2仪器或设备：

(1)高压锅:

厂家：潮安县顺发五金制品有限公司

批号：xk16-203-00048

(2)显微镜:

厂家：Olympus

批号：XS-212-201;;;3.实验详细步骤

（1）取材（2）固定

（3）制作石蜡切片

Ⅰ放入包埋盒中已固定好的组织用自来水冲洗24小时（为了把甲醛除去）；

Ⅱ脱水；Ⅲ透明；Ⅳ浸蜡；

Ⅴ切片：切成5μm厚的切片；

Ⅵ贴片：载玻片经过防脱片处理。;;;;;;;;;;;阴性对照组只加入试剂2液，而不加1液。标本上覆盖塑料盖片，置样品于湿盒中，37℃标记1h，后4℃过夜。（20h以上）。0.01MPBS洗5min×3次。

6.滴加5%牛血清白蛋白封闭液，室温中30min，甩掉封闭液，不洗。;;;;;;;;;;;;;