热应激牛乳汁外泌体相关miRNAs的筛选及miR-27a-3p对牛乳腺上皮细胞的作用研究.pdf

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目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词VII

前言IX

第一部分文献综述1

第一章热应激1

1.热应激定义及其评判标准1

1.1温湿指数1

1.2呼吸频率2

1.3直肠温度2

2.热应激对奶牛泌乳的危害2

2.1热应激对奶牛乳腺组织生长发育的影响2

2.2热应激对产奶量的影响3

2.3热应激对乳成分的影响3

2.4热应激对牛乳腺上皮细胞的影响4

3.热应激的防控措施4

4.miRNAs与热应激5

4.1miRNAs的形成与作用机制5

4.2miRNAs对热应激的调控作用5

5.MEK/ERK1/2信号通路与热应激6

5.1MEK/ERK1/2信号通路6

5.2MEK/ERK1/2信号通路对热应激的调控作用7

第二章外泌体9

1.外泌体的形成9

2.外泌体的分离与鉴定9

3.外泌体的研究进展10

3.1外泌体与疾病11

3.2外泌体与泌乳11

3.3外泌体miRNAs的研究进展12

第二部分试验研究13

第一章荷斯坦牛乳外泌体的分离及鉴定13

1.材料方法13

1.1试验材料13

1.2试验方法14

2.结果与分析16

2.1奶牛热应激状态的判定16

2.2牛乳外泌体的分离17

2.3牛乳外泌体的鉴定18

3.讨论18

4.小结19

第二章热应激与非热应激荷斯坦牛乳外泌体中差异表达miRNAs的鉴定和生物信息

学分析21

1.材料方法21

1.1试验材料21

1.2试验方法22

2.结果与分析23

2.1测序质量分析23

2.2miRNAs长度分布24

2.3miRNAs差异表达分析26

2.4GO和KEGG富集分析28

2.5差异表达miRNAs的筛选及验证29

3.讨论31

4.小结32

第三章miR-27a-3p对乳腺上皮细胞凋亡、增殖及乳蛋白合成的影响及调控机制33

1.材料方法33

1.1试验材料34

1.2试验方法36

2.结果与分析43

2.1建立敲低或过表达miR-27a-3p的乳腺上皮细胞模型43

2.2miR-27a-3p对乳腺上皮细胞线粒体损伤的影响44

2.3miR-27a-3p对乳腺上皮细胞凋亡的影响45

2.4miR-27a