生产菌种的生产.ppt

温度获得孢子的最适温度范围区间很窄。例如：龟裂链霉菌斜面的最适温度为36.5～37℃。湿度北方湿度控制在40～45％，南方湿度控制在35～42％，所得孢子质量好。一般来说，真菌对湿度要求高，放线菌对湿度要求低。0102（二）培养温度和湿度（三）培养时间和冷藏时间丝状菌在斜面培养基上的生长发育过程可分为五个阶段：孢子发芽和基质菌丝生长阶段、气生菌丝生长阶段、孢子形成阶段、孢子成熟阶段、斜面衰老菌丝自溶阶段。01过于年轻的孢子经不起冷藏，过于衰老的孢子会导致生产能力下降。02孢子冷藏的时间宜短不宜长。（四）接种量母瓶：活化、纯化，使保藏菌种生长，并去处变异株。所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。子瓶:大量繁殖，得到大量孢子。接种：①从母斜面上点接种，选取生长好的单菌落②接种时密一点，得到大量的孢子。孢子培养时注意湿度，且子斜面使用一般不超过1个月种子的质量要求：量：要求达到一定的浓度质:形态（生长处于某个阶段、均匀等等）理化指标：C、N、P的含量，pH、酶活等无污染二、影响种子质量的因素及其控制种子质量重要受孢子质量、培养基、种龄和接种量等因素影响。摇瓶种子的质量主要以外观颜色、效价、菌丝浓度和黏度以及糖代谢、pH变化为指标。（一）培养基易于被菌体直接吸收和利用，营养成分适当丰富和完全，氮源和维生素含量较高，总浓度较细薄。第六章生产菌种的生产种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。01种子扩大培养的概念:02种子扩培的目的：1接种量的需要2菌种的驯化3缩短发酵时间、保证生产水平4种子的要求：5总量及浓度能满足要求6生理状况稳定，个体与群体活力强，移种至发酵罐后，能够迅速生长7无杂菌污染8孢子的制备放线菌孢子的制备采用琼脂斜面培养基，培养基中含适合产包子的麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和无机盐等，碳源和氮源不要太丰富。温度28或37℃，培养5～14天。第一节种子制备过程霉菌孢子的制备以大米、小麦、玉米、麸皮等天然农产品为培养基。温度25～28℃，培养4～14天。细菌孢子的制备细菌的斜面培养多采用限制碳源而氮源丰富的牛肉膏、蛋白胨培养基。温度37或28℃，培养5～10天。种子的制备实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。（一）实验室阶段对于不产芽孢和孢子的微生物，实验室阶段的种子扩培最终是获得一定数量和质量的菌体，如谷氨酸的种子培养。目的：种子扩培到一定的量和质，根据菌种的特点最终的培养物可分为两类：1、培养物选择的原则对于不产孢子和芽胞的微生物——获得一定数量和质量的菌体菌丝体培养步骤少，因而更容易获得量和质稳定的种子，但操作繁琐。对于产孢子的微生物获得一定数量和质量的孢子便于操作，但需要更仔细的控制。获得一定数量和质量的菌丝体培养基选择的原则培养基的选择应该是有利于菌体的生长，对孢子培养基应该是有利于孢子的生长。在原料方面，实验室种子培养阶段，规模一般比较小，因此为了保证培养基的质量，培养基的原料一般都比较精细。起始接种物的传代问题01细菌保藏斜面→活化斜面02产孢子保藏→母斜面→子斜面目的：使菌种的传代次数尽可能的少。03生产车间阶段培养物的选择原则在生产车间阶段，最终一般都是获得一定数量的菌丝体。缩短发酵时间有利于获得好的发酵结果菌丝体比孢子要有利：12培养基选择的原则01目的：获得一定数量和质量的菌体，因此培养基的选择应首先考虑的是有利于孢子的发育和菌体的生长，所以营养要比发酵培养基丰富。02在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于发酵培养基，这有两个方面的原因:一是成本二是驯化0323%Option1谷氨酸：三级发酵青霉素：三级发酵一级种子（小罐）→二级种子（中罐）→发酵一级种子（摇瓶）→二级种子（小罐）→发酵一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数30%Option23、发酵级数的确定1在发酵产品的放大中，反应级数的确定是非常重要2