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ICS65.020.30
I
CCSB43
团体标准
T/SXSL16-2024
猪耳缘成纤维细胞培养技术规范
Technicalspecificationsforporcineearmarginfibroblastculture
2024-12-29发布2025-01-29实施
陕西省饲料协会发布
T/SXSL16-2024
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由陕西省饲料协会提出并归口。
本文件起草单位：西北农林科技大学、陕西正能农牧科技有限责任公司、杨凌衍数生物科技有限公
司、陕西省畜牧产业试验示范中心、陕西省畜牧技术推广总站、大荔县畜牧发展中心。
本文件主要起草人：胡建宏、温飞、冯贤辀、高磊、张毅、陈辉、连星、李胜、陈晓旭、郭松茂、
田佳卉、韩帅琪、胡张涛、贾永宏、于太永、张曼、杨晓茹、席华明、赵彩会、罗强。
本文件为首次发布。
本文件由西北农林科技大学负责解释。
单位：西北农林科技大学。
地址：陕西省咸阳市杨凌区邰城路3号。
电话
邮编：712100
Ⅰ
T/SXSL16-2024
猪耳缘成纤维细胞培养技术规范
1范围
本文件描述了猪耳缘成纤维细胞培养技术规范的术语与定义、溶液配制、供体选择、组织块获取、
原代培养、传代培养、细胞冻存、质量检测。
本文件适用于酶消化法分离培养猪耳缘成纤维细胞。
2.规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
DB65/T3502-2013绵羊耳缘皮肤组织成纤维细胞体外培养技术规程
NY/T3075-2017畜牧养殖场消毒技术
3术语与定义
3.1供体（Donor）
提供耳缘组织的猪。
3.2耳缘成纤维细胞（Earmarginfibroblast）
来自于耳缘的成纤维细胞。成纤维细胞是一种形态多样的细胞类型，呈梭型或不规则三角形，具
有卵圆形的核和突起的胞质。
3.3细胞培养（Cellculture）
在适当的条件下（37℃，5%CO）培养，让细胞生长和增殖。
2
3.4细胞传代（Cellpassage）
将培养的细胞在一定的条件下进行分离、再培养的过程。
4试剂耗材及仪器设备
试剂耗材及仪器设备参照附录A执行；
溶液配制参照附录B执行。
5供体选择
符合品种特征，三代谱系清晰，健康的6月～12月龄种猪。
6组织块获取
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T/SXSL16-2024
按照DB65/T3502-2013执行。
7原代培养
7.1将耳组织块用75%酒精清洗3次后，转移至PBS（含有5%双抗）中清洗3次，随后将其转入超净工
作台。
7.2用手术刀片刮去组织块表皮及皮下组织，保留真皮层，PBS冲洗2次后，将组织用无菌剪刀剪成1
3
mm小块。
7.3用巴氏吸管将组织块转移至50mL离心管，使其自然沉淀，移去上清液，加入2m
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