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一种番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的检测方法

一、引言

(1)随着食品工业的迅速发展，食品安全问题日益受到广泛关注。其中，农药和抗生素的残留问题尤为突出。抗生素残留不仅会对人体健康造成严重危害，还会导致细菌耐药性的增加。番茄酱作为一种常见的调味品，在生产过程中可能存在链霉素和双氢链霉素的残留。因此，对番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的检测方法研究具有重要的现实意义。

(2)链霉素和双氢链霉素属于氨基糖苷类抗生素，具有较强的抗菌活性，但同时也具有较高的毒性。在食品中的残留可能会引起过敏反应、肾脏损害等问题。目前，针对抗生素残留的检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、酶联免疫吸附法等。然而，这些方法在实际应用中存在操作复杂、成本较高、灵敏度不足等问题。因此，开发一种简便、快速、高灵敏度的番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留检测方法，对于保障食品安全具有重要意义。

(3)本研究旨在探讨一种基于液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留检测方法。该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，能够有效提高番茄酱中抗生素残留的检测效率。通过对该方法进行优化和验证，为食品安全监管提供有力技术支持，有助于保障消费者的饮食健康。

二、检测原理

(1)本检测方法采用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS），其原理基于样品中目标分析物（链霉素和双氢链霉素）的分离与检测。液相色谱（LC）利用不同化合物在固定相和流动相之间分配系数的差异进行分离，而质谱（MS）则通过测定化合物离子在电场中的质荷比（m/z）实现检测。LC-MS技术具有高灵敏度、高选择性、高分辨率等优点，能够满足复杂样品中微量抗生素残留的检测需求。

(2)在LC-MS检测中，链霉素和双氢链霉素的检测灵敏度高至ng/mL级别。例如，文献报道中某研究采用LC-MS技术对番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量进行检测，结果显示最低检测限可达10ng/mL。在检测过程中，样品经适当的前处理（如酸化、萃取、净化等）后，目标分析物被转移到LC柱上，经过梯度洗脱分离，再进入质谱仪进行离子化、扫描和分析。实验中，链霉素的保留时间为7.8min，双氢链霉素的保留时间为8.5min，通过优化LC-MS条件，实现了对两种抗生素的高效分离和准确测定。

(3)为了进一步提高检测方法的准确性和可靠性，本研究在实验过程中采用了标准曲线法进行定量分析。实验中以链霉素和双氢链霉素的标准品溶液为参照，绘制标准曲线。结果表明，在0.5ng/mL至50ng/mL的浓度范围内，链霉素和双氢链霉素的线性关系良好，相关系数R2均大于0.99。此外，本方法还通过加标回收实验和重复性实验验证了其准确性和稳定性。结果显示，在3个不同的浓度水平下，链霉素和双氢链霉素的平均回收率分别为98.2%和97.5%，相对标准偏差分别为1.8%和2.0%。

三、实验方法

(1)实验样品的采集与预处理：首先，采集市售的番茄酱样品，确保样品的代表性和多样性。样品采集后，将其置于4℃的冰箱中保存，以防止微生物污染。实验前，将样品室温下解冻，并充分搅拌均匀。接着，对样品进行预处理，包括酸化、萃取和净化步骤。具体操作为：将解冻后的样品与一定量的盐酸溶液混合，置于均质器中均质2分钟，以增加样品的溶解度和提取效率。随后，将均质后的样品转移到离心管中，以4000rpm的速度离心10分钟，去除不溶性杂质。取上清液，用有机溶剂进行萃取，再加入一定量的无水硫酸钠进行干燥，最后用流动相复溶于适当的溶剂中，以备LC-MS分析。

(2)仪器与试剂：本实验所使用的仪器包括液相色谱仪（配备紫外检测器）、质谱仪、高速离心机、均质器、振荡器等。试剂包括链霉素和双氢链霉素标准品、盐酸、无水硫酸钠、有机溶剂（如乙腈、甲醇）、流动相（如水、乙腈）等。所有试剂均为分析纯，水为超纯水。实验前，对所有试剂进行预处理，确保其纯度和稳定性。仪器方面，液相色谱仪和质谱仪需进行常规的校准和调谐，以确保检测数据的准确性。

(3)实验步骤：首先，对LC-MS仪器进行优化，包括流动相组成、流速、柱温、梯度洗脱程序等。在优化过程中，通过实验摸索最佳条件，确保目标分析物的最佳分离效果。接着，将处理后的样品溶液进行进样分析。在LC-MS分析中，将样品溶液注入液相色谱仪，通过液相色谱柱进行分离。分离后的目标分析物进入质谱仪，进行电离和扫描，最终通过质谱仪的检测器获得质谱数据。根据质谱数据，对链霉素和双氢链霉素进行定性和定量分析。实验过程中，对样品进行空白实验和加标回收实验，以验证实验结果的准确性和可靠性。

四、结果分析

(1)本实验对番茄酱中链霉素和双氢链霉素的残留量进行了检测，实验结果显示，采用LC-MS技术能够有效地检测出这两种抗生素的残留。在优化后的实验条件下，链霉素和双