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《制药发酵技术》
实训四胰岛素的发酵生产
任务目标
一
1.了解胰岛素的理化性质和结构;
2.掌握微生物发酵制备胰岛素的基本原理、方法和基本操作技能。
任务实施前准备
(一)查找资料,了解胰岛素基础知识
胰岛素(Insulin)是糖尿病,是I型糖尿病的特效药物,可以促进血液中葡萄糖的利用而降低血糖,并调节糖、脂肪及蛋白质代谢。WHO相关资料表明:糖尿病已成为继心血管疾病、肿瘤之后的第3位主要疾病,严重威胁全人类健康,全球共有糖尿病患者1.75亿人,中国糖尿病患者9200万人,已超越印度成为亚洲第一大国。全球胰岛素的销售额年复合增长率达14.5%。2022年全球胰岛素药物的销售额超过160亿美元,因此胰岛素药物的开发和生产具有重大的社会效益和经济效益。
二
(二)确定生产技术、生产原料和工艺路线
1.确定生产技术:微生物发酵技术
2.确定生产原料:基因重组大肠杆菌
3.确定胰岛素的生产工艺流程,如图2-4-1
(三)器材与试剂
1.器材:试管、烧杯、冰箱、高压灭菌锅、恒温培养箱、离心机、小型发酵罐等。
2.试剂:基因重组大肠杆菌BL21、甘油、葡萄糖、蛋白胨、铵盐、CaCO3、苯乙酸、天然油脂(如玉米油)、化学消泡剂等。
任务实施
(一)菌种制备
1.目的基因的提取
2.提取质粒
3.基因重组
4.将质粒送回大肠杆菌
三
(二)胰岛素的发酵与提取工艺过程
(三)胰岛素的问题与展望
胰岛素在糖尿病治疗中具有无可替代的作用和地位,但因注射给药让许多患者产生畏惧心理,使其作用发挥受到限制。为了减少不便和疼痛,医药界正在全力以赴投入研究,开发更新的胰岛素剂型及给药方式。目前有关新式胰岛素产品的研究方向,可归纳为3类:新的给药方式,例如:口服、吸入;改变药物代谢机制;改进注射手段,让使用者无痛,这是国际国内胰岛素类药物研究发展的前沿和趋势。
(四)结束工作
1.填好所有操作记录单、任务单、各种评价表。
2.检查设备仪表是否洁净完好。
3.清理工作场地与环境卫生。
4.进行任务总结(小组讨论与汇报、组间互评、教师点评与总结)。
填写实训评价单
四
任务探究
1.探讨胰岛素发酵工艺的优化?
2.本实训采用补料分批操作法制备胰岛素优点有那些?
五
谢谢!
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