革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究的开题报告.pdfVIP

革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究的开题报告--第1页

革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研

究的开题报告

一、研究背景与意义

革兰阴性菌广泛分布于自然界和医院环境中，是医院感染最主要的

病原体之一。而超广谱β-内酰胺酶是细菌耐药性产生的重要机制之一，

目前全球已有超过140种β-内酰胺酶，其中SHV型β-内酰胺酶就是一种

广泛分布的酶类型，已经在多个国家和地区的临床革兰阴性菌中广泛检

测到。因此，研究革兰阴性菌SHV型超广谱β-内酰胺酶的耐药机制，对

于防治医院感染和维护公共健康具有重要意义。

二、研究目标与内容

本研究旨在探究革兰阴性菌SHV型超广谱β-内酰胺酶产生的耐药机

制和抗菌剂对该酶的抑制效果。具体内容包括：

1.采用PCR技术检测SHV型超广谱β-内酰胺酶在不同革兰阴性菌中

的分布情况。

2.确定SHV型超广谱β-内酰胺酶的氨基酸序列并分析其结构和功能。

3.通过分子对接技术预测不同抗菌剂与SHV型超广谱β-内酰胺酶结

合的能力。

4.构建革兰阴性菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药模型，研究其耐药

机制。

三、研究方法

1.采用PCR技术检测SHV型超广谱β-内酰胺酶在各种革兰阴性菌中

的分布情况：收集来自医院临床检测的革兰阴性菌样本，提取其DNA，

运用特异性引物进行PCR扩增SHV型β-内酰胺酶基因片段。

革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究的开题报告--第1页

革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究的开题报告--第2页

2.确定SHV型超广谱β-内酰胺酶的氨基酸序列：将PCR扩增的SHV

型β-内酰胺酶基因片段克隆到表达载体上，通过IPTG诱导表达获得纯化

的SHV型超广谱β-内酰胺酶，并进行质谱分析，进而确定其氨基酸序列。

3.分析SHV型超广谱β-内酰胺酶的结构和功能：利用Python和R

软件分析SHV型超广谱β-内酰胺酶的结构和功能，根据其氨基酸序列预

测其空间结构和结合模式等。

4.预测不同抗菌剂与SHV型超广谱β-内酰胺酶的结合能力：利用

Autodockvina软件分别预测SHV型超广谱β-内酰胺酶与多种抗菌剂的结

合能力，并分析其结合模式。

5.构建SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药模型：将SHV型超广谱β-内酰

胺酶浓缩到一定浓度，加入抗菌剂，研究SHV型超广谱β-内酰胺酶的耐

药性以及对抗菌剂的敏感性。

四、预期成果

本研究的预期成果如下：

1.分析SHV型超广谱β-内酰胺酶在不同革兰阴性菌中的分布情况。

2.确定SHV型超广谱β-内酰胺酶的氨基酸序列及其结构和功能特征。

3.预测不同抗菌剂与SHV型超广谱β-内酰胺酶的结合模式及其结合

能力。

4.构建SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药模型，研究其耐药机制。

5.为临床合理使用抗菌剂提供理论基础。

革兰阴性杆菌SHV型超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究的开题报告--第2页