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银杏叶乙醇提取物对菜青虫的触杀和拒食活性

一、1.材料与方法

(1)实验材料：实验所用银杏叶为新鲜采集，经鉴定为银杏GinkgobilobaL.的叶子。实验中使用的菜青虫为家蚕幼虫BombyxmoriL.，由实验基地提供，并在实验室内进行适应性饲养。实验前，选取健康、大小一致的菜青虫幼虫作为实验对象。实验所需试剂包括无水乙醇、蒸馏水、NaOH、HCl等，均为分析纯。

(2)提取方法：银杏叶乙醇提取物的制备采用超声波辅助提取法。首先，将干燥的银杏叶研磨成粉末，称取一定量的粉末放入超声波提取器中。然后，加入适量的无水乙醇，设定提取温度、时间和功率，进行超声提取。提取完成后，将提取液过滤，滤液在40℃下浓缩至一定体积，得到银杏叶乙醇提取物。

(3)实验方法：触杀活性实验采用浸渍法进行。将一定浓度的银杏叶乙醇提取物溶液涂覆在实验板上，将菜青虫幼虫放置在实验板上，观察一定时间内幼虫的死亡情况。拒食活性实验采用喷雾法进行。将不同浓度的银杏叶乙醇提取物溶液均匀喷雾在菜青虫幼虫的饲料上，记录一定时间内菜青虫的取食量，计算拒食率。实验过程中，设置对照组和空白组，以排除其他因素的影响。所有实验均重复三次，确保实验结果的可靠性。

二、2.银杏叶乙醇提取物的制备

(1)实验采用超声波辅助提取法，将干燥的银杏叶粉末与无水乙醇按质量比1:10混合，置于超声波提取器中。提取温度设定为60℃，提取时间为40分钟，功率为300W。通过这种方法，可以提取出银杏叶中的有效成分，如黄酮类化合物和萜类化合物。提取率可达95%以上，高于传统热提取方法。

(2)实验中，以银杏叶粉末与无水乙醇的比例、提取温度、提取时间、功率等因素作为变量，进行了多次实验。例如，当银杏叶粉末与无水乙醇比例为1:10时，在60℃、40分钟、300W的条件下，黄酮类化合物的提取量为5.2mg/g。在优化条件下，实验得到的银杏叶乙醇提取物中黄酮类化合物的含量显著提高。

(3)为了验证提取方法的有效性，将得到的银杏叶乙醇提取物与市售的银杏叶提取物进行了对比。结果显示，本实验得到的银杏叶乙醇提取物中黄酮类化合物的含量高于市售产品，且抗氧化活性也更强。例如，本实验得到的提取物在DPPH自由基清除实验中的IC50值为1.2mg/mL，而市售产品的IC50值为1.8mg/mL。这表明本实验采用的提取方法具有良好的效果。

三、3.银杏叶乙醇提取物对菜青虫的触杀活性实验

(1)实验中，将银杏叶乙醇提取物配制成不同浓度梯度，分别为0.1%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%。将菜青虫幼虫置于涂有不同浓度银杏叶乙醇提取物的实验板上，每个浓度设置3个重复组，以排除偶然误差。实验温度设定为25℃，相对湿度为60%，光照条件为自然光。

(2)观察并记录幼虫的死亡时间，计算不同浓度银杏叶乙醇提取物的触杀活性。实验结果显示，随着浓度的增加，触杀活性逐渐增强。在1.0%浓度下，菜青虫幼虫的死亡时间最短，为48小时。在0.1%浓度下，菜青虫幼虫的死亡时间为72小时。

(3)为了进一步验证实验结果的可靠性，对实验数据进行统计分析。结果显示，不同浓度银杏叶乙醇提取物对菜青虫的触杀活性具有显著差异（P0.05）。这表明银杏叶乙醇提取物对菜青虫具有一定的触杀作用，且随浓度增加，触杀效果更加明显。

四、4.银杏叶乙醇提取物对菜青虫的拒食活性实验

(1)拒食活性实验中，将银杏叶乙醇提取物配制成0.1%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%的浓度梯度。实验时，将不同浓度的银杏叶乙醇提取物均匀喷洒在菜青虫幼虫的饲料上，确保饲料表面均匀覆盖。同时设置一个对照组，即未喷洒任何提取物的饲料。

(2)将处理过的饲料放置在培养皿中，将菜青虫幼虫放入培养皿中，记录幼虫在一定时间内的取食量，包括取食次数和取食量。实验过程中，保持培养皿内的温度和湿度稳定，确保实验条件一致。实验重复3次，每次实验观察时间为24小时。

(3)通过计算拒食率来评估银杏叶乙醇提取物的拒食活性。拒食率计算公式为：(对照组取食量-处理组取食量)/对照组取食量×100%。实验结果显示，随着银杏叶乙醇提取物浓度的增加，菜青虫幼虫的拒食率也随之升高。在1.0%浓度下，拒食率达到了最高，为60%。此外，拒食活性实验的数据经过统计分析，表明不同浓度银杏叶乙醇提取物对菜青虫的拒食活性存在显著差异（P0.05），表明银杏叶乙醇提取物对菜青虫具有明显的拒食作用。

五、5.结果与分析

(1)通过实验结果分析，银杏叶乙醇提取物对菜青虫的触杀活性显著。在1.0%浓度下，触杀效果最佳，菜青虫幼虫的死亡时间最短，仅为48小时。这表明银杏叶乙醇提取物中的有效成分能够迅速作用于菜青虫，导致其死亡。

(2)拒食活性实验结果显示，银杏叶乙醇提取物