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牙龈卟啉单胞菌血凝素2与血红素结合多肽的免疫原性研究

朱永潮;安婷;刘颖;张子路;杨秋波

【摘要】目的探究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.g)血凝素

2(hemagglutinin-2,HA2)与血红素结合的多肽片段作为抗原的免疫原性.方法

SD(SpragueDawley)雄性大鼠随机分成三组,多肽免疫组:多肽片段

(DGFPGDHYAVMISK)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,使其乳化,颈背部皮下注射多肽

乳化物0.2ml;佐剂对照组:颈背部皮下注射佐剂0.2ml;磷酸盐缓冲液(PBS)对照组:

颈背部皮下注射PBS0.2ml.在第0、35、49天取唾液以及内眦取血,用间接

ELISA法检测血清及唾液抗体,评估多肽片段的免疫原性.结果多肽免疫组产生的大

鼠血清抗体效价为1:9600,唾液抗体效价为1:1200,高于PBS及佐剂对照组;多肽免

疫组大鼠血清IgG的A450nm值为(1.592±0.416),佐剂对照组大鼠血清IgG的

A450nm值为(0.121±0.027),PBS对照组大鼠血清IgG的A450nm值为

(0.116±0.024).多肽免疫组大鼠血清IgG分别与佐剂对照组、PBS对照组比较,差

异具有统计学意义(P0.05).多肽免疫组唾液的sIgA的A450nm值为

(0.514±0.056),佐剂对照组唾液的sIgA的A450nm值为(0.120±0.028),PBS对照

组唾液的sIgA的A450nm值为(0.121±0.021),多肽免疫组唾液sIgA分别与佐剂

对照组、PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05).结论多肽免疫提高大鼠血

清及唾液的抗体水平,其免疫策略为牙周炎的免疫研究提供了基础.

【期刊名称】《继续医学教育》

【年(卷),期】2017(031)005

【总页数】4页(P163-166)

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【关键词】牙龈卟啉单胞菌;抗体效价;多肽

【作者】朱永潮;安婷;刘颖;张子路;杨秋波

【作者单位】首都医科大学附属北京口腔医院研究所,北京100050;首都医科大学

附属北京口腔医院研究所,北京100050;首都医科大学附属北京口腔医院研究所,北

京100050;首都医科大学附属北京口腔医院研究所,北京100050;首都医科大学附

属北京口腔医院研究所,北京100050

【正文语种】中文

【中图分类】R378.99

牙龈卟啉单胞菌是一种革兰氏阴性、不产黑色素、不酵解糖、能分解蛋白的专性厌

氧类杆菌，其毒性因子有半胱氨酸蛋白酶、凝血素、脂多糖、菌毛等[1]，是慢性

牙周炎的致病菌之一。P.g的生长和定植都依赖于细菌摄取铁及卟啉，但其自身缺

乏合成卟啉及铁的能力，只能从生长环境中获得。P.g摄取卟啉及铁依靠血凝素2

与血红素及其他含卟啉的蛋白结合[2]。杨秋波等通过多肽内切酶水解rHA2，获得

了与氯化血红素结合的多肽片段，质谱分析明确了与氯化血红素结合多肽的氨基酸

序列为DHYAVMISKTGTNAG及YAVNDGFPGDHYAVMISK，共同序列为

DHYAVMISK[3-4]。本研究旨在利用含有与氯化血红素结合的HA2多肽片段作为

抗原免疫SD大鼠，研究多肽片段的免疫原性，为进一步研究多肽免疫的牙周炎保

护作用奠定基础。

1.1多肽合成

人工合成多