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病原生物与免疫学基础(第5版)课件 第十三章 免疫学实训项目.pptx

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免疫学实训项目;1、了解直接凝集试验原理、方法和结果判断;

2、了解间接凝集试验原理、方法和结果判断;

3、了解酶联免疫试验(ELISA)原理、方法和结果判断;

4、了解胶体金免疫层析试验的原理、方法和结果判断。;1、直接凝集试验

2、间接凝集试验

3、ELISA检测HBsAg

4、胶体金免疫层析试验;·原理:颗粒性抗原(细菌或细胞)与相应的抗体特异性结合,一定条件下出现肉眼可见的凝集现象。;·方法:左边:诊断血清+痢疾杆菌,出现凝集。

右边:生理盐水(NS)+痢疾杆菌,不出现凝集。;·原理:

将可溶性抗原吸附在与反应无关的载体颗粒表面做成诊断试剂,再与标本中的Ab结合,可出现载体颗粒的被动凝集现象。;·载体颗粒:

红细胞(O型人红细胞,羊血红细胞及兔红细胞):间接血凝试验

聚苯乙烯乳胶颗粒:间接乳胶凝集试验

活性炭:间接炭凝集试验;·检测链球菌溶血素“O”:

在黑色方格反应板上取3个,分别滴加待检血清、阳性血清、阴性血清1滴,然后各格滴一滴“O”乳胶试剂,用牙签充分混合,摇动2min,观察试验结果。;·原理:将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面,用洗涤的方法将固相上的抗原抗体复合物与液相中的游离成分分开,加入酶的底物后,通过酶对底物催化的显色反应程度,对标本中抗原或抗体进行定性或定量。;·结果判断:通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。;·原理:当试纸条下端浸入液体标本中,下端吸水材料吸收液体向上移动。若标本中有HCG,可与抗HCG免疫金复合物结合。此抗原抗体复合物流至测试区即被固相抗体所获,在膜上显出红色反应线条(T线),过剩的免疫金复合物继续前行,质控参照区与固相抗小鼠IgG结合,呈现红色质控线条(C线)。;·结果判断:C表示对照线、T表示检测线;

如果CT都显色,为阳性,表示已经怀孕,

如果只有C显色,为阴性,表示没有怀孕,

若只有T显色,则表示此验孕棒无效。;★绘图表示免疫层析试验的结果判断。

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