DB3301T 1081-2017 三叶青种苗生产技术规程　.docxVIP

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DB3301/T1081—2017

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由杭州市农业局提出并归口。

本标准起草单位：杭州中泽生物科技有限公司、杭州万向职业技术学院、浙江省中药研究所、浙江大学。

本标准主要起草人：陈加红、李梦君、沈晓霞、沈斌斌、吴殿星、周志丹、杨峰。

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三叶青种苗生产技术规程

1范围

本标准规定了三叶青种苗生产的术语定义、扦插繁殖场地选择和准备、扦插育苗、组培育苗、病虫害防治、出圃、档案管理、模式图等。

本标准适用于三叶青种苗生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB3095环境空气质量标准

GB4285农药安全使用标准

GB5084农田灌溉水质标准

GB/T8321农药合理使用准则GB15618土壤环境质量标准

3术语和定义

下列术语和定义用于本标准

3.1

三叶青

又名三叶崖爬藤(学名：TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg),葡萄科多年生草质藤本，

块根入药。

3.2

母本株

生长健壮，作为营养繁殖材料采集对象的三叶崖爬藤植株。

3.3

组培苗

利用侧芽作为外植体，采用组织培养技术生产的种苗。

4产地选择及准备

4.1产地环境

产地土壤环境应符合GB15618规定的二级标准；空气质量应符合GB3095规定的二级标准；灌溉水质应符合GB5084规定的二级标准。

4.2温室育苗

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扦插及组培苗移植通常选择在配备各类移动苗床的温室中进行，如无移动苗床，地面需覆盖园艺地布。遮光率为50%～60%。

4.3露地育苗

露地育苗场地表面应平整无杂草，覆盖园艺地布，搭建荫棚，其上覆盖遮光率为50%～60%的遮阳网。

5扦插育苗

5.1扦插基质

以70%园土+20%泥炭+10%草木灰作扦插基质，加施基质量1.5%～2.5%的腐熟有机肥或缓释肥作基肥，充分拌匀，消毒。扦插前装入50孔穴盘，压紧。

5.2扦插时间

3月上旬～6月中旬，10月上旬～11月下旬。

5.3插穗选择

在母本株上选择二年生健壮枝条，斜剪成2节～3节、8cm～10cm长的插穗，上部留1叶。

5.4插穗处理

扦插前用甲基托布津(70粉剂)500倍液浸泡插穗全株1h～2h,然后用IBA500mg/L浸泡插穗基部1min后马上扦插。

5.5扦插方法

将插穗斜插入穴孔，每穴1株，入土深度为技条的1/3～1/2,插后压紧，浇透水。

5.6插后管理

5.6.1浇水

扦插后35d～40d生根出叶前，每天喷水(浇水)1次~2次，保持基质潮湿。生根后减少浇水次数，增加单次浇水量。

5.6.2保温保湿

可在穴盘上方搭建小拱棚，保持60%～80%的空气相对湿度和15℃~25°℃温度。

5.6.3施肥

扦插后20d,每隔15d喷施1次浓度为0.3%磷酸二氢钾肥液，一般喷施3次～4次。

5.6.4炼苗

扦插后60d～80d,视根系及枝叶生长情况，分次逐步延长通风时间、提高光照强度，最后达到栽培正常条件。

6组培育苗

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6.1组培流程

外植体选取——外植体消毒——外植体切段——初代培养——增殖培养——生根培养——炼苗一一组培苗移植

6.2外植体的获得和处理

6.2.1外植体的选取

选择无病虫害、无病毒侵染的生长健壮的当年生嫩枝。

6.2.2外植体的消毒

将采取的外植体嫩枝，用洗涤剂水刷洗，经自然水冲洗干净。在超净工作台上，将外植体嫩枝先放入75%的乙醇溶液中浸泡10s后，用无菌水洗净，再放入0.1%HgCl2或2%次氯酸钠溶液中消毒10min~20min后，用无菌水冲洗3次～5次。

6.2.3外植体的切段

在超净工作台上，用火焰灭菌的解剖刀、镊子将嫩枝均匀切分成长0.8cm~1.0cm的小段，每段含1个腋芽，接种于事先准备好的诱导培养基中，每瓶5株～10株。芽朝上插入培养基中。

6.3初代培养

6.3.1初代培养基

基本培养基为MS培养基。植物激素为：0.3mg/L～0.5mg/L浓度的苄氨基腺嘌呤(6-BA);0.01mg/L~0.05mg/L浓度的萘乙酸(NAA)。

6.3.2培养条件

培养温度为25℃±2℃。前期暗培养，待有芽萌发后光照强度30001x~50001x培养，光照