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如何用气相色谱法测定草莓中草甘膦残留量

一、1.仪器与试剂

(1)在进行草莓中草甘膦残留量的测定时，需要使用高性能气相色谱仪（HPLC）作为主要分析仪器。该仪器应配备电子捕获检测器（ECD）或火焰光度检测器（FPD），以确保对草甘膦残留量进行高灵敏度和高选择性的检测。此外，还需要配备一个合适的色谱柱，如毛细管柱，其长度和内径应适合分析草甘膦及其同系物。辅助设备包括自动进样器、柱温箱、数据工作站和氮气发生器等。

(2)在试剂方面，需要准备一系列标准溶液，包括草甘膦标准品、内标物、溶剂和稀释剂。草甘膦标准品应具有高纯度，通常为99%以上。内标物选择时应考虑其与目标分析物的相似性，以减少系统误差。溶剂通常使用无水甲醇或乙腈，稀释剂则根据样品基质选择合适的溶剂。此外，还需要准备一定量的酸碱试剂，如盐酸和氢氧化钠，用于样品的预处理。

(3)样品前处理所需的设备包括均质器、旋涡混合器、离心机、加热器、冷凝器和移液器等。均质器和旋涡混合器用于样品的充分混合和均质化，以确保样品中草甘膦分布均匀。离心机用于分离样品中的杂质和提取草甘膦。加热器和冷凝器用于样品的浓缩和定容。移液器用于准确移取样品和试剂，确保分析结果的准确性。所有设备在使用前均需进行校准和验证，以保证实验的精确性和可靠性。

二、2.样品前处理

(1)样品前处理是气相色谱法测定草莓中草甘膦残留量的关键步骤之一。首先，将草莓样品进行清洗，去除表面的泥土和杂质。随后，将清洗后的草莓样品进行组织捣碎，以增加样品的表面积，提高提取效率。捣碎后的样品通过适当的筛孔尺寸进行筛选，以去除较大的果皮和茎等非目标物质。

(2)提取过程中，通常采用溶剂提取法，如使用无水甲醇或乙腈作为提取溶剂。将捣碎并筛选后的草莓样品与提取溶剂在均质器中混合，进行充分提取。提取后的溶液通过旋涡混合器进一步混匀，以确保草甘膦等目标分析物充分溶解。之后，将混合溶液通过离心机进行离心，去除悬浮的固体颗粒。

(3)离心后的上清液通过移液器转移至浓缩瓶中，并在加热器上缓慢加热至近干，以去除大部分溶剂。随后，使用适量的流动相将浓缩后的样品溶液定容至一定体积，以便进行气相色谱分析。在定容过程中，可能需要使用冷凝器来防止溶液蒸发。最后，将定容后的样品溶液过0.22微米的滤膜，以去除可能存在的微粒，确保样品的纯度和分析结果的准确性。

三、3.气相色谱法操作步骤

(1)操作步骤开始于气相色谱仪的预热，通常需预热至柱温箱设定的温度，如200℃。在进样前，需将样品溶液通过0.22微米的滤膜过滤，以确保样品的纯净。使用自动进样器将约2μl的样品溶液注入进样口，进样口温度通常设定为230℃。在此过程中，需确保进样口和连接管路无泄漏。

(2)色谱柱选用100m×0.25mm×0.25μm的毛细管柱，流动相为混合溶剂，如甲醇和水的体积比为80:20。流速设定为1.0ml/min，柱温程序从初始的100℃以10℃/min的速率升至200℃，保持5分钟。在此过程中，使用火焰光度检测器（FPD）进行检测，检测器温度设定为300℃。以某批次草莓样品为例，草甘膦的保留时间为5.8分钟。

(3)数据采集完成后，使用数据工作站对色谱图进行分析。以草甘膦标准曲线为依据，通过峰面积比对样品中的草甘膦含量进行定量。例如，若某草莓样品中草甘膦的峰面积为10000，标准曲线的斜率为2000，则样品中草甘膦的含量为5mg/kg。同时，对样品进行空白实验和加标回收实验，以验证方法的准确性和可靠性。例如，在加标回收实验中，加入5mg/kg的草甘膦标准品，回收率应在85%至115%之间。

四、4.结果计算与评价

(1)结果计算首先基于色谱分析得到的峰面积进行。通过比较样品中草甘膦的峰面积与草甘膦标准曲线的对应峰面积，可以计算出样品中草甘膦的浓度。标准曲线的绘制通常涉及一系列已知浓度的草甘膦标准溶液，通过比较其峰面积与浓度之间的关系，得到线性回归方程。在实际分析中，将样品的峰面积代入该方程，即可得到样品的草甘膦浓度。

(2)对于多个样品的测定，通常需要计算每个样品的均值和标准差，以评估样品之间的变异性和测定的重复性。例如，若对20个草莓样品进行测定，可计算这20个样品的草甘膦含量的均值和标准差，从而评估整体残留水平。若标准差较小，说明样品之间的一致性较好；若标准差较大，则表明样品之间可能存在较大的差异。

(3)在评价结果时，还需考虑方法的精密度和准确度。精密度通常通过重复测定同一样品的结果来评估，而准确度则通过加标回收实验来验证。例如，若在样品中添加一定量的草甘膦标准品，然后测定回收率，理想情况下回收率应在80%至120%之间。若回收率在这个范围内，说明该方法准确可靠。同时，还需比较实际测定值与法定允许限量，以确保样品的草甘膦残留量符合食品