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不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较.pdf

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不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较--第1页

不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较

目的比较不同来源的诱导剂建立的卵巢早衰动物模型。方法选取97只雌

性SD大鼠分别给予120mg/kg的环磷酰胺、白消安、35%半乳糖食物丸,制备

卵巢早衰动物模型。通过观察体重变化,激素血清浓度水平,卵巢病理切片等分

析数据。结果单次给药环磷酰胺后,大鼠体重增加非常缓慢,卵巢受损;随着

血清LH浓度上升趋势,血清E2浓度下降趋势和受损的卵巢,35%半乳糖食物

颗粒饲喂的大鼠体重增加缓慢,其中白蛋白和总蛋白以及受损的卵巢的血清浓度

显著升高(P<0.05)。结论不同诱导物可产生不同特征POF模型,为进一步研

供有效的实验依据。

标签:大鼠;卵巢早衰;动物模型

卵巢早衰(POF)是指40岁以前卵巢早衰或卵巢功能衰退,主要发生在平

均绝经年龄前两年的标准偏差人口,其原因可能与内源性基因,异常自身免疫,

感染,医疗疗法等影响有关。POF具有明显异质性及显着遗传性。染色体异常被

一直被认为是POF的常见原因。基于POF基因组学致突变大鼠模型在探索,且

不同模型之间存在较大差异,因此在探索POF治疗方法时很难选择合适的动物

模型。本文通过比较不同方法致大鼠卵巢早衰动物模型之间的差异,为POF治

疗进一步研究提供实验依据。

1材料和方法

1.1一般材料

环磷酰胺由上海金穗生物有限公司提供。35%半乳糖食品颗粒由南通营养饲

料有限公司提供。

1.2研究方法

雌性大鼠在室温(22±2)℃和相对湿度(50±10)%的标准实验室条件下培

养12h光暗周期,水和食物随意提供。每只大鼠的平均食物消耗为28g。所有手

术均在戊巴比妥钠麻醉下进行。将体重约为(180~200)g的56只SD大鼠分成

A、B、C组,A组大鼠用120mg/kg的溶于0.9%盐水溶液中的单次腹膜内注射

环磷酰胺处理,B组大鼠用单一的用0.9%盐水溶液以12mg/kg的剂量自发注射

白消安注射液,C组大鼠为对照组,用0.9%盐水溶液腹膜内处理。每周测量所

有大鼠的体重。在环磷酰胺和白消安的治疗后第30天,将所有大鼠称重并处死

以供进一步研究。

41只体重180~200g的SD大鼠分为两组,一组小鼠饲喂35%半乳糖食物

丸,另一组饲喂标准食物。每周称量所有大鼠,并在35%半乳糖食物颗粒或标准

食物施用后第70天处死。最后,通过腹膜内注射5mg/kg戊巴比妥钠麻醉动物

后,通过眼眶后穿刺收获1.0~1.2ml全血样品。然后将动物处死。将样品在室

不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较--第1页

不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较--第2页

温下以5000rpm/min离心5min并收集上清液。采用ELISA试剂盒测定血清FSH,

LH,E2浓度作为评估动物模型性激素水平的指标。对于35%半乳糖食品实验,

通过测定半乳糖,总蛋白和白蛋白的血清浓度水平作为评价POF发生的补充参

数。

1.3病理检查

处死动物后收集卵巢并进行卵巢组织学分析。收集的卵巢固定在10%甲醛

中,制成5mm厚石蜡切片并进行HE染色,观察切片中的卵泡数目变化。

1.4统计学方法

数据分析包括组平均值和标准偏差的计算。行t检验;以P<0.05为差异有

统计学意义。

2结果

2.1环磷酰胺和白消安诱导POF模型

用120mg

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