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PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响--第1页

PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响

吕峰;于洋;梁栋;李兆明;尤伟;张斌

【摘要】目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶14(PTPN14)对乳腺癌细胞增殖能力的影响.

方法首先在乳腺癌细胞株MCF-7中建立稳定高表达PTPN14的细胞系,并通过

RT-PCR和蛋白免疫印迹实验进行鉴定;然后通过RNA干扰技术靶向抑制蛋白表达,

采用细胞计数法、噻唑蓝(MTT)法、细胞克隆形成实验、BrdU细胞掺入实验以及

裸鼠体外成瘤实验,检测PTPN14对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖的影响.结果通过

在mRNA和蛋白水平的检测,证实高表达PT-PN14的MCF-7稳定细胞系建立成

功.MTT法结果表明,培养第5天时高表达PTPN14组的MCF-7细胞数约为对照组

的60%(P<0.05);细胞计数实验表明,与对照组比较,高表达PTPN14的MCF-7细

胞数在培养第3、4、5天时明显减少(P<0.05);细胞克隆形成实验中,对照组和高

表达PTPN14组的克隆数分别为(125±25)个和(62±13)个,差异具有统计学意义(P

<0.05);同时,低表达内源性PTPN14将明显促进细胞增殖.进一步的裸鼠体内成瘤

实验中,高表达PTPN14组的肿瘤体积仅为对照组的1/5(P<0.05);对照组和

PTPN14组的肿瘤重量分别为:(0.6±0.2)g和(0.2±0.1)g,差异具有统计学意义(P<

0.05).结论高表达PTPN14抑制乳腺癌细胞的增殖能力.

【期刊名称】《华中科技大学学报(医学版)》

【年(卷),期】2015(044)003

【总页数】5页(P289-293)

【关键词】蛋白酪氨酸磷酸酶14;细胞增殖;乳腺癌

【作者】吕峰;于洋;梁栋;李兆明;尤伟;张斌

PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响--第1页

PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响--第2页

【作者单位】河南省人民医院(郑州大学人民医院)乳腺外科,郑州450003;河南省人

民医院(郑州大学人民医院)乳腺外科,郑州450003;河南省人民医院(郑州大学人民

医院)乳腺外科,郑州450003;郑州大学第一附属医院肿瘤内科,郑州450052;河南省

人民医院(郑州大学人民医院)乳腺外科,郑州450003;河南省人民医院(郑州大学人

民医院)乳腺外科,郑州450003

【正文语种】中文

【中图分类】R739.41;R730.261

非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶14(tyrosine-proteinphosphatasenon-receptor

type14,PTPN14)是蛋白质酪氨酸磷酸酶超家族的成员,参与调节多种细胞过

程,包括细胞生长、分化、细胞周期和肿瘤发生等过程。但是,PTPN14在乳腺

癌中的具体功能并不完全清楚。本研究以乳腺癌MCF-7细胞为对象,探讨

PTPN14对乳腺癌细胞增殖能力的影响。

1.1主要材料

乳腺癌细胞系MCF-7由本实验室保存(购自ATCC公司);RNA抽提试剂、RT-

PCR逆转录试剂盒、T4DNA连接酶、PCR产物分子量标准、TaqDNA聚合酶、

dNTP混合物、高保真TaqDNA聚合酶为北京Tiangen公司产品;DMEM培养

液及新生牛血清购自Hyclone公司;四甲基偶氮唑

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