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白细胞散点图操作原理和操作观察

WBC散点图

运用流式细胞计数法和其它生物粒子的物理和化学性质进行检测。血液标本经吸取稀释后进行化学染色，血细胞在鞘流内的试剂包裹下排成一行通过检测小孔，并有半导体激光束照射到血细胞上。当血细胞经过激光通路时，光束在每个血细胞的不同方向上产生光散射，通过检测散射光，将光信号转化为电脉冲，可得到有关细胞体积大小和材质信息，进而描画出二维散点图。

观察

当激光照射到血细胞颗粒上时，产生光散射，散射光强度取决于颗粒直径和观察角度等因素。仪器对前向散射光检测，提供有关血液细胞体积大小信息；同时对侧向散射光检测，提供细胞内部信息。?当光照射到经过荧光染色的血细胞等荧光材料上，就会产生比入射光波长更长的光。通过测量荧光强度可以得到有关血细胞染色程度信息,荧光向所有方向散射，仪器检测侧向荧光。

横坐标：SSC轴，代表侧向散射光信号强度

纵坐标：SFL轴，代表侧向荧光信号强度

散点图中，利用侧向散射光SSC和荧光SFL将白细胞分成五类：中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞。

侧向散射光SSC反映细胞内部颗粒结构复杂程度。

荧光染料和细胞中DNA/RNA核酸结合，侧向荧光信号SFL反映核酸含量，反映细胞发育成熟程度。粒细胞完整生长要历经原粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞,进而分化为成熟杆状核和分叶核粒细胞。粒细胞成熟过程中细胞中核酸含量逐步减少。

嗜碱性粒细胞比例很小，采用另外一个专用通道检测,,五分类通道提供白细胞四种分类中性、单核、淋巴、嗜酸。