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2025破伤风梭菌检验及其临床意义(全文)
破伤风梭菌(Clostridiumtetani)是引起破伤风的病原菌,大量存在于
人动物肠道中,由粪便污染土壤后经伤口感染引起疾病。本菌繁殖体抵
抗力与其他细菌相似,但其芽抱抵抗力强大。在土壤中可存活数十年,能
耐煮沸40〜5。分钟。对青霉素敏感,磺胺类有抑菌作用。
一、生物学特性
1.形态结构
本菌为革兰阳性细长杆菌,大小为(0.5~l.7)|iimX(2.l~18)|Lim。但培养
48h后,尤其在芽胞形成后易转变为革兰阴性。有周鞭毛、无荚膜。芽胞
正圆形,直径大于菌体,位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状,为本菌典型的
形态特征。
2.培养特性
专性厌氧,在厌氧血琼脂平板上呈扩散生长,35笆培养48h后,菌落扁
平、半透明灰白色、边缘不齐、周边疏松呈羽毛状,有溶血,不易获得单
个菌落,可见薄膜状爬行生长物,如提高瑞脂浓度(4),可抑制其扩散生
长。在庖肉培养基中,肉汤轻度混浊,肉渣部分消化,微变黑,有少量气
体,有腐败恶臭。
3.生化特性
不发酵糖类,能液化明胶、产生硫化氢、多数菌株产生口引味、不还原硝
酸盐,对蛋白质有微弱消化作用。气液相色谱可检出的代谢产物有乙酸、
丙酸、丁酸、乙醇丁醇。
4.抗原构造
有菌体(O)抗原鞭毛(H)抗原,根据鞭毛抗原可分为1。个血清型。各型
细菌所产生的毒素其生物学活性与免疫学活性均相同,可被任何类型的抗
毒素中。
5.抵抗力
芽胞经100°C煮沸lh可完全被杀灭,能耐干热15(TClh,5石炭酸
10-15ho在干燥的土壤尘埃中可存活数年。
二、微生物学检验
根据患者的病史典型的临床症状即可作出诊断,一般不需做细菌学检查,
在特殊情况下有必要时才进行微生物学检验。
1.检验程序
图片
2.标本采集
采集感染伤口的脓液、组织液或坏死组织等。
3.直接显微镜
检查取脓液或坏死组织等直接涂片、革兰染色镜检,如见革兰阳性杆菌,
呈鼓槌状典型形态,可初步报告。
4.分离培养
将标本接种于庖肉培养基,置75~85笆水浴加热30min,以杀死标本中
所混有的杂菌,于37笆培养2~4天,有生长现象后,再转种新鲜的厌氧
血琼脂平板,置于厌氧环境培养24h,破伤风梭菌可呈薄膜状迁徙生长。
5.鉴定
典型的鼓槌状菌体形态,结合在庖肉培养基及厌氧血琼脂平板上的生长现
象,分离的细菌不发酵糖类、不还原硝酸盐,能液化明胶、产生硫化氢,
多数菌株产生噪。通过动物毒力保护力试验阳性即可最后鉴定。
三、临床意义
破伤风梭菌广泛存在于土壤、人动物肠道中,可引起人类的外源性感染。
当机体的伤口被污染时,或分娩时使用不洁器械剪断脐带等,本菌的芽胞
可侵人伤口,发芽变成繁殖体,生长繁殖,产生外毒素,引起破伤风。
该菌无侵袭力,仅在侵入局部生长繁殖,其致病作用完全有赖于所产生的
破伤风痉挛毒素(tetanospasmin),该毒素是由质粒编码,属于神经毒素,
其毒性极强,仅次于肉毒毒素,化学性质为蛋白质,不耐热,65oC30min
即可破坏;亦可被肠道中存在的蛋白酶所破坏,所以,存在于正常人动
物肠道中不会致病。
破伤风梭菌本身不进人血流,但破伤风痉挛毒素可经血液、淋巴吸收到达
中枢神经系统,尤其对脑干神经脊髓前角运动神经细胞有高度亲力,
能与神经节甘脂结合,封闭脊髓抑制性触突,从而阻止抑制性触突末端释
放抑制性神经介质,破坏正常的抑制性调节功能,导致肌肉痉挛性收缩,
主要为骨骼肌痉挛,典型的症状是咀嚼肌痉挛所造成的牙关紧闭、苦笑面
容及持续性背部肌肉痉挛(角弓反张)。机体呈强直性痉挛、抽、呼吸困难,
最终可因窒息而死亡。
参考文献:吕厚东,吴爱武.临床微生物学检验技术[M].武汉:华中科技大学
出版社,2020
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