固相萃取净化-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定土壤中草铵膦、草.docxVIP

PAGE

1-

固相萃取净化-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定土壤中草铵膦、草

一、1.样品前处理

(1)土壤样品的采集与制备是进行草铵膦和草的提取分析的第一步。通常，土壤样品需在采样点周围均匀分布，以减少采样误差。根据GB/T19489-2004《土壤环境监测技术规范》，采样深度一般设定为0-20cm，采样点间距为50m。采集的土壤样品需使用不锈钢或聚乙烯容器盛装，避免使用含有金属离子的容器，以免干扰分析结果。样品采集后，需在阴凉处晾干，并去除石块、植物残体等杂质。经过初步处理的样品，再进行研磨，使其粒度达到2mm以下，以便于后续的提取和净化。

(2)在样品前处理过程中，固相萃取（SolidPhaseExtraction,SPE）技术被广泛应用于草铵膦和草的净化。SPE技术具有操作简便、净化效率高、回收率好等优点。具体操作步骤如下：首先，将研磨好的土壤样品过筛，取适量样品加入SPE小柱中。然后，使用一定量的水或去离子水进行预洗，去除柱中的杂质。接着，用适量甲醇或乙腈溶液进行提取，使目标分析物充分溶解。提取液随后通过SPE小柱，目标分析物被吸附在SPE小柱的吸附剂上，而杂质则随流出液排出。最后，使用一定量的甲醇或乙腈溶液对SPE小柱进行洗脱，收集洗脱液，并在氮气下浓缩至近干。最后，用适量流动相复溶于定容瓶中，待超高效液相色谱-三重四极杆质谱法（UHPLC-MS/MS）分析。

(3)在实际操作中，为了提高草铵膦和草的提取效率和回收率，常常需要优化SPE条件。例如，在SPE小柱的选择上，C18小柱因其对极性和非极性物质都有较好的吸附能力，常被用于草铵膦和草的提取。在提取溶剂的选择上，甲醇因其具有较好的溶解性和较低的极性，通常作为提取溶剂。此外，提取液的pH值、流速、温度等因素也会对提取效率产生影响。以某研究为例，通过优化SPE条件，草铵膦的回收率从初始的70%提高到了90%，草的回收率从80%提高到了95%。这些优化后的条件为后续的超高效液相色谱-三重四极杆质谱法分析提供了良好的基础。

二、2.色谱-质谱条件优化

(1)超高效液相色谱-三重四极杆质谱法（UHPLC-MS/MS）在分析土壤中草铵膦和草时，色谱柱的选择对分离效果至关重要。通常选用C18色谱柱，因为其对极性和非极性物质的分离效果均较好。流动相的组成对分离效果也有显著影响。以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相，通过调节两者的比例和流速，可以实现对草铵膦和草的有效分离。例如，在某一研究中，通过使用乙腈：0.1%甲酸水溶液（90:10，v/v）作为流动相，流速为0.4mL/min，成功实现了草铵膦和草的高效分离。

(2)在质谱分析方面，选择合适的离子源和扫描模式对于提高检测灵敏度和选择性至关重要。电喷雾电离（ESI）因其高灵敏度，常被用于分析极性较强的化合物，如草铵膦和草。在ESI模式下，优化电压和毛细管温度等参数，可以提高离子化效率。以某研究为例，通过将电压设为3.5kV，毛细管温度设为300℃，实现了草铵膦和草的准确定量和定性。此外，选择合适的扫描模式，如多反应监测（MRM）模式，可以增加检测的特异性，降低假阳性率。

(3)为了提高草铵膦和草的检测灵敏度，优化碰撞能量（CE）和碰撞气（CAD）等参数也是关键。通过实验确定合适的碰撞能量，可以使分析物离子在碰撞池中发生有效的碎裂，从而提高检测灵敏度。例如，在某一研究中，通过将草铵膦的碰撞能量设为20eV，草的碰撞能量设为18eV，结合CAD流量为15mL/min，实现了对这两种化合物的低检测限（LOD）分析。通过这样的优化，草铵膦和草的LOD分别达到了0.5ng/g和0.3ng/g，满足土壤样品分析的要求。

三、3.质量控制与数据分析

(1)在质量控制方面，为确保分析结果的准确性和可靠性，需要建立严格的质量控制体系。这包括使用标准样品进行校准和验证，以监控分析方法的性能。例如，在草铵膦和草的分析中，使用国家环境保护标准样品（如GBW）进行校准，确保方法检测限（MDL）和定量限（LOQ）符合要求。在一项研究中，通过使用GBW标准样品，草铵膦的MDL达到了0.1ng/g，LOQ为0.3ng/g，草的MDL为0.05ng/g，LOQ为0.15ng/g。此外，通过空白实验和加标回收实验，验证了方法的准确性和精密度，草铵膦的平均回收率为92.5%，草的平均回收率为88.2%，均符合实验室质量控制标准。

(2)数据分析是质量控制的重要组成部分。通过使用专业的色谱-质谱数据处理软件，如Chromeleon或MassLynx，对原始质谱数据进行处理和分析。在数据处理过程中，首先进行峰提取，然后进行峰匹配，以确定目标化合物的存在。在一项实际分析中，通过峰匹配，草铵膦和草的匹配度分别达到了98%和99%，证实了目标化