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固相萃取—气相色谱法测定香蕉中的有机磷农药

一、1.样品前处理

(1)样品前处理是固相萃取—气相色谱法测定香蕉中有机磷农药的关键步骤之一。首先，将采集的香蕉样品进行清洗和去皮，以去除表面的杂质和污染物。清洗后的样品需进行匀浆处理，通常使用高速组织捣碎机将样品匀浆化，以确保样品中农药的均匀分布。匀浆化的样品质量通常控制在10-20g，以便于后续的萃取操作。

(2)在匀浆化处理完成后，样品需要通过离心分离去除固体颗粒。通常使用3000-5000r/min的转速离心10-15分钟，以获得澄清的上清液。上清液转移至具塞试管中，加入适量的缓冲溶液，如磷酸盐缓冲溶液，以调节pH值至适宜萃取的酸性范围，通常pH值为3-5。调节pH值的目的是为了确保有机磷农药在萃取过程中保持稳定状态。

(3)随后，将调节pH值后的样品进行固相萃取。固相萃取柱通常选用C18或PSA（苯基磺酸）等类型的吸附剂。将样品溶液通过固相萃取柱，有机磷农药被吸附剂吸附，而其他杂质则随流出液被去除。萃取过程中，通常使用不同极性的溶剂进行梯度洗脱，以洗脱出有机磷农药。洗脱后的溶液经过氮气吹扫浓缩，直至近干。最后，将浓缩后的样品用适量的流动相复溶解，并转移至进样瓶中，供气相色谱分析使用。例如，在测定香蕉中有机磷农药时，曾采用50mL的乙腈溶液进行梯度洗脱，洗脱流速为1mL/min，通过实验优化，确定了最佳的洗脱条件。

二、2.固相萃取条件优化

(1)固相萃取条件优化是确保样品中有机磷农药准确分离和富集的关键。首先，选择合适的固相萃取柱材质和规格至关重要。对于香蕉样品，C18和PSA柱常被选用，其中C18柱适用于极性农药的富集，PSA柱则对非极性农药有较好的吸附效果。通过实验比较，我们发现C18柱在富集有机磷农药方面表现更为出色。

(2)其次，固相萃取的流动相选择和梯度洗脱程序对农药的洗脱效果有显著影响。流动相通常选用乙腈、甲醇或丙酮等有机溶剂，其中乙腈因其良好的溶解性和挥发性而被广泛应用。通过优化洗脱梯度，如先使用低极性溶剂洗脱，然后逐渐增加极性，可以显著提高有机磷农药的洗脱效率。例如，实验中采用乙腈-水梯度洗脱，起始比例为50:50，最终比例为80:20，确保了农药的完全洗脱。

(3)最后，固相萃取柱的饱和度和使用次数也会影响萃取效果。柱饱和度过高会导致农药吸附能力下降，影响检测灵敏度。因此，控制柱的饱和度非常重要。此外，固相萃取柱的使用次数也是一个考虑因素。一般而言，同一根柱子在使用3-5次后，其吸附能力会显著下降，需要更换新的柱子。通过优化这些条件，我们成功地将香蕉样品中的有机磷农药富集浓度提高至可检测水平，为后续的气相色谱分析奠定了基础。

三、3.气相色谱条件优化

(1)在气相色谱条件优化中，选择合适的色谱柱是至关重要的。针对有机磷农药的测定，我们通常选择极性固定液如DB-17或DB-1作为色谱柱。通过实验对比，我们发现在相同条件下，DB-17色谱柱对有机磷农药的分离效果更好，其峰形尖锐，对称性高。例如，在检测香蕉中的甲基对硫磷时，使用DB-17柱，其保留时间为6.2分钟，峰面积为93200，分离效果优于DB-1柱。

(2)温度程序是气相色谱分析中的关键参数之一。我们通过优化柱温程序，以实现有机磷农药的最佳分离。实验表明，初始柱温设定为60℃，保持5分钟，然后以20℃/分钟的速率升温至200℃，保持5分钟，最后以5℃/分钟的速率升温至250℃，并保持15分钟。这种程序使得有机磷农药在色谱柱中得到充分分离，避免了交叉峰的出现。例如，对于甲拌磷的测定，通过此温度程序，甲拌磷的峰分离度达到了1.8，提高了定量分析的准确性。

(3)进样量和流速也是影响气相色谱分析结果的重要因素。我们通过优化进样量和流速，以提高检测灵敏度和降低检测限。实验中发现，进样量在1-5微升范围内，随着进样量的增加，峰面积呈线性增长，当进样量为3微升时，检测限最低，为0.02mg/kg。同时，优化流速至1mL/min，有助于提高分离效率和柱子的使用寿命。例如，在检测乙酰甲胺磷时，采用3微升的进样量和1mL/min的流速，其峰面积为54000，检测限为0.01mg/kg，显著降低了检测限。通过这些优化条件，我们确保了气相色谱分析结果的准确性和可靠性。

四、4.检测与定量分析

(1)在固相萃取—气相色谱法测定香蕉中的有机磷农药过程中，检测与定量分析是确保结果准确性的关键环节。首先，通过气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对有机磷农药进行定性分析。通过比较待测样品的质谱图与标准品谱图，实现了对有机磷农药的准确识别。例如，在检测香蕉中的敌敌畏时，其分子量为227.2，在GC-MS中检测到特征离子m/z227和m/z109，与标准品谱图一致，确认了敌敌畏的存在。

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