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一种同时测定食品中草铵膦及其代谢物残留量的方法

一、引言

(1)草铵膦作为一种广谱除草剂，广泛应用于农业、林业等领域，可以有效控制杂草生长，提高作物产量。然而，草铵膦及其代谢物在食品中的残留问题日益引起人们关注。草铵膦残留不仅可能对人类健康造成潜在威胁，还可能对生态环境造成负面影响。因此，开发一种快速、准确、灵敏的测定方法对于保障食品安全具有重要意义。

(2)随着科学技术的发展，针对食品中草铵膦及其代谢物残留量的检测方法不断改进。目前，常用的检测方法主要包括色谱法、光谱法、电化学法等。其中，气相色谱-质谱联用法（GC-MS）因其高灵敏度和高选择性，被广泛应用于食品中草铵膦及其代谢物的定量分析。然而，GC-MS检测方法存在样品前处理复杂、分析周期长等缺点，限制了其在实际应用中的推广。

(3)本研究旨在开发一种同时测定食品中草铵膦及其代谢物残留量的新方法。该方法采用高效液相色谱-串联质谱联用法（HPLC-MS/MS），结合固相萃取（SPE）和基质匹配外标法定量分析。与传统方法相比，该方法具有操作简便、分析速度快、灵敏度高、准确度好等优点。通过优化实验条件，本研究将该方法应用于实际样品的检测，为食品中草铵膦及其代谢物残留量的快速检测提供了一种新的技术手段。

二、实验原理与方法

(1)本实验采用高效液相色谱-串联质谱联用法（HPLC-MS/MS）对食品中草铵膦及其代谢物进行定量分析。该方法首先通过固相萃取（SPE）对样品进行前处理，去除干扰物质，提高检测灵敏度。随后，样品经过高效液相色谱（HPLC）分离，将草铵膦及其代谢物与样品中的其他成分分离。最后，通过串联质谱（MS）对分离后的化合物进行检测和定量。HPLC-MS/MS系统具有高灵敏度和高选择性，能够准确测定食品中草铵膦及其代谢物的含量。

(2)在实验过程中，草铵膦及其代谢物在SPE柱上通过选择合适的溶剂进行洗脱，从而去除样品中的杂质。洗脱液经过浓缩、定容等步骤后，用于HPLC分析。HPLC系统采用梯度洗脱方式，通过优化流动相组成和流速，确保草铵膦及其代谢物在色谱柱上得到有效分离。在MS检测环节，通过选择合适的离子源和扫描方式，实现对目标化合物的定性分析和定量测定。实验中，采用基质匹配外标法定量，通过标准曲线法计算样品中草铵膦及其代谢物的浓度。

(3)为了提高实验结果的准确性和可靠性，本实验对草铵膦及其代谢物的检测方法进行了优化。首先，对SPE柱的填料和洗脱条件进行筛选，确保样品中草铵膦及其代谢物能够有效富集。其次，优化HPLC流动相和梯度洗脱程序，提高分离效果。最后，对MS检测条件进行优化，包括扫描方式、碰撞能量等参数，确保目标化合物的准确检测。通过以上优化，本实验建立了一种高效、准确、灵敏的食品中草铵膦及其代谢物残留量测定方法，为食品安全监管提供了有力技术支持。

三、仪器与试剂

(1)实验所需的仪器包括高效液相色谱仪（HPLC）一台，配备紫外检测器（UV）和电喷雾离子化（ESI）源串联质谱仪（MS），用于样品的分离和检测。此外，还需要固相萃取装置一套，用于样品前处理。此外，实验室还配备了超声波清洗器、旋转蒸发仪、分析天平、离心机等辅助设备。

(2)试剂方面，本实验使用的主要试剂包括草铵膦及其代谢物的标准品、内标物质、流动相溶剂（乙腈、水）、洗脱溶剂（甲醇、乙酸乙酯）、无水硫酸钠、无水碳酸钠、氯化钠等。所有试剂均为分析纯，符合实验要求。此外，实验用水为去离子水，电导率低于18.2MΩ·cm。

(3)样品前处理过程中，使用到的固相萃取小柱为C18型，填料粒度为40-60目。小柱在使用前需进行活化处理，以确保萃取效率。实验过程中，还需使用到实验室常用的一次性塑料管、玻璃试管、滤膜等耗材。所有耗材均需符合实验要求，确保实验结果的准确性和可靠性。

四、样品前处理

(1)样品前处理是食品中草铵膦及其代谢物残留量测定的重要环节。本研究采用固相萃取（SPE）方法对样品进行前处理。具体操作为：将样品溶液过柱，使用乙腈/水溶液进行初步洗脱，去除杂质。随后，使用甲醇/水溶液进行第二次洗脱，收集目标化合物。实验结果显示，使用5ml甲醇/水溶液洗脱，回收率可达90%以上。

(2)在SPE柱填料的选择上，本实验对比了C18、C8和C30三种不同极性的填料。结果显示，C18填料对草铵膦及其代谢物的吸附能力最强，且回收率最为稳定。在实验中，C18填料的使用量为1g，填料粒度为40-60目，能够有效去除样品中的干扰物质。

(3)为了提高前处理效果，本实验对样品溶液的pH值进行了优化。实验结果表明，在pH值为3.0时，草铵膦及其代谢物的回收率最高，可达95%。此外，在实验过程中，还对比了不同浓度梯度洗脱液对回收率的影响。结果表明，使用5ml甲醇/水溶液洗脱时，草铵膦及其代谢物的回收率