DB21T 2734.1-2017 病菌PCR 分型诊断方法 第1部分：大肠杆菌PCR 检测方法　　.pdfVIP

ICS11.220

B41

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T2734.1—2017

病菌PCR分型诊断方法

第1部分：大肠杆菌PCR检测方法

MethodofPCRtypingdiagnosisforbacterial

Part1：MethodofPCRdetectionforEscherichiacoli

2017-02-23发布2017-03-23实施

辽宁省质量技术监督局发布

DB21/T2734.1—2017

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3缩略语1

4原理1

5仪器和器材1

6试剂和材料1

7操作步骤2

7.1样品的采集、前处理、存放与运输2

7.1.1采样注意事项2

7.1.2采样工具2

7.1.3内脏样品的采集与前处理2

7.1.4内容物的采集与前处理2

7.1.5粪便的采集与前处理2

7.1.6血液2

7.1.7大肠杆菌纯培养物3

7.1.8保存与运输3

7.2PCR检测3

7.2.1DNA提取3

7.2.2PCR3

7.2.2.2PCR反应条件3

7.2.2.3电泳4

8试验成立的条件4

9结果判定4

附录A（规范性附录）试剂配制5

A.1电泳缓冲液（50倍）5

A.1.10.5mol/L乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH8.0）5

A.1.2TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50倍)5

A.21%琼脂糖凝胶5

I

DB21/T2734.1—2017

前言

标准《病菌PCR分型诊断方法》按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

标准《病菌PCR分型诊断方法》分为两个部分：

——第1部分：大肠杆菌PCR检测方法；

——第2部分：产气荚膜梭菌PCR分型检测方法。

本部分为病菌PCR分型诊断方法的第1部分。

本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。

本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。

本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。

本标准主要起草人：赵凤菊、赵晓彤、关淼、关乃鹏、李蓉、陈瑶、张雅为、魏澍、李冰、高慎

阳、蔡景明、王宏军、王竹、邓文超