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海洋微微型蓝细菌肌尾病毒丰度的实时荧光定量PCR分析方法
【摘要】目的:为了实现对海洋微微型蓝细菌肌尾病毒的快速精确定量,本文基于肌尾病毒nrdA基因序列,运用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR),建立一种新型快速灵敏的高通量检测方法,对肌尾病毒丰度进行定量。方法:肌尾病毒nrdA基因片段的合成与扩增,用于连接转化入感受态细胞,培养阳性质粒并制作标准子。以nrdA基因为检测目标,建立并优化qPCR反应条件,获得最优反应体系,制备标准曲线,得到回归方程,建立一个特异灵敏的qPCR检测方法,并应用于海水样品的检测。结果:成功建立qPCR方法,重复性较好,可检测10-107
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