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一种利用三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素的方法

一、引言

(1)番茄红素作为一种天然的类胡萝卜素色素，不仅赋予番茄等水果和蔬菜鲜艳的红色，还具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。随着人们对健康饮食的追求，番茄红素在食品、医药和化妆品等领域的应用越来越广泛。传统的番茄红素提取方法主要依赖于化学合成或从天然资源中提取，但这些方法存在着提取效率低、成本高、环境污染等问题。因此，开发一种高效、经济、环保的番茄红素生产方法具有重要的现实意义。

(2)微生物发酵作为一种绿色、可持续的生物技术手段，近年来在食品、医药和化工等领域得到了广泛应用。三孢布拉氏霉菌（Brettanomycesbruxellensis）是一种广泛分布于自然界中的酵母菌，具有较强的代谢活性，能够发酵多种有机物质，并产生丰富的次级代谢产物。研究表明，三孢布拉氏霉菌在发酵过程中能够产生大量的番茄红素，具有很高的应用潜力。

(3)本文旨在探讨利用三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素的方法。通过对发酵条件、培养基配方、发酵工艺等进行优化，旨在提高番茄红素的产量和质量，降低生产成本，为番茄红素的生产提供一种新的技术途径。同时，本文还将对发酵过程中可能出现的质量问题进行分析，并提出相应的解决方案，以期为番茄红素的工业化生产提供理论依据和技术支持。

二、三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素的优势

(1)三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素具有显著的优势。首先，相较于化学合成方法，微生物发酵法具有更高的效率。根据相关研究，三孢布拉氏霉菌在发酵过程中能够将原料中的番茄红素含量提高至0.5-1.0%，远高于化学合成方法的0.1-0.3%。例如，在2018年的一项研究中，研究人员通过优化发酵条件，成功将番茄红素的产量提高了50%。

(2)其次，微生物发酵法具有环保、可持续的特点。与传统化学合成方法相比，发酵法在生产过程中产生的废水、废气等污染物显著减少。据统计，微生物发酵法生产番茄红素的废水排放量仅为化学合成法的1/10，废气排放量更是降低了90%。此外，发酵法所使用的原料多为可再生资源，如玉米、小麦等，有利于实现资源的循环利用。

(3)最后，微生物发酵法在产品质量方面具有优势。发酵法制备的番茄红素具有更高的纯度和生物活性。研究表明，发酵法制备的番茄红素纯度可达95%以上，而化学合成法的产品纯度通常在70%左右。此外，发酵法制备的番茄红素具有更强的抗氧化活性，可有效抵抗自由基对人体的损害。例如，在2020年的一项研究中，发酵法制备的番茄红素对DPPH自由基的清除率达到了96.8%，显著高于化学合成法产品的80.5%。

三、三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素的具体方法

(1)三孢布拉氏霉菌发酵制备番茄红素的具体方法主要包括以下几个步骤。首先，选取优质的三孢布拉氏霉菌菌株，通过液体培养基对其进行活化，确保菌株的活力和繁殖能力。活化过程中，培养基的成分通常包括葡萄糖、酵母提取物、硝酸铵等，以提供必要的营养和生长条件。活化后的菌株在适宜的温度（通常为28-30°C）和pH值（5.5-6.5）下培养24-48小时，直至达到对数生长期。

(2)接下来，进行种子扩大培养。将活化后的菌株接种到扩大培养基中，扩大培养基的成分与活化培养基相似，但浓度更高，以促进菌株的大量繁殖。扩大培养通常在发酵罐中进行，控制好温度、pH值和溶氧条件，确保菌株的生长速度和产量。经过约12-24小时的扩大培养，获得足够数量的种子液，用于后续的发酵过程。

(3)发酵阶段是制备番茄红素的关键步骤。将种子液接种到发酵培养基中，发酵培养基通常含有番茄提取物或番茄粉，以提供发酵所需的底物。发酵过程中，需要严格控制发酵条件，包括温度、pH值、溶氧量和搅拌速度等。发酵温度通常设定在28-32°C，pH值维持在5.5-6.5之间，溶氧量控制在2-5mg/L。发酵时间根据菌株特性和发酵条件而定，一般为48-72小时。发酵结束后，通过离心、过滤等手段分离出发酵液，然后对发酵液进行提取、纯化和浓缩等后续处理，最终得到高纯度的番茄红素产品。

四、发酵过程中的质量控制与优化

(1)发酵过程中的质量控制是确保番茄红素产量和质量的关键环节。首先，对发酵培养基的成分进行精确控制至关重要。例如，研究表明，在培养基中添加0.5%的酵母提取物可以显著提高三孢布拉氏霉菌的生长速度和番茄红素的产量。在2019年的一项研究中，通过优化培养基配方，番茄红素的产量从原本的0.4g/L提高到了0.8g/L。

(2)其次，发酵过程中的温度和pH值控制对番茄红素的生成有重要影响。最佳发酵温度通常设定在28-30°C，而pH值应维持在5.5-6.5之间。例如，在一项针对不同温度和pH值对番茄红素生成影响的实验中，当温度设置为30°C，pH值为6.0时，发酵液中的番茄红素含量