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|噬菌体侵染细菌实验疑点辨析
噬菌体侵染细菌实验是证明DNA是遗传物质的经典实验之一,人教版新教材中采用了图文并茂的方式介绍该实验,但是受篇幅所限,教材对实验的介绍做了较多简略,且缺乏相关背景内容的铺垫,故师生在学习噬菌体侵染细菌实验时产生了不少疑问.这些疑问经各类习题的加工形成很多误解,这些误解又通过习题的流传而产生更大影响,对师生理解该实验的本质造成了很大困扰,也不利于学生理解科学的本质和科学素养的提升.
在摩尔根等人将遗传因子也就是基因定位于染色体上后,染色体的主要成分也被确认主要是DNA和蛋白质,基因的化学本质是DNA还是蛋白质就成为遗传学界新的热点议题.
科学界分析遗传物质应具有以下4个特征:
可以复制并且传递给后代;可以储存大量信息;能够控制性状;能够发生突变.
当时核酸研究的权威人物列文提取的DNA分子量约为1500,且测得的四种碱基数量接近,由此列文提出DNA是由四种核苷酸各一个组成的小分子物质,即四核苷酸假说.这么简单的小分子是不可能编码遗传信息的,由此直接排除了DNA是遗传物质的可能性.而蛋白质已知是由多种氨基酸构成的大分子物质,似乎在结构上更适合作为遗传物质,因而当时绝大多数科学家都把目光集中在蛋白质身上.
1943年艾弗里实验提出DNA是转化因子,该实验引起了很大争议:荚膜的有无可以看作是一对性状,而DNA能够引起性状的改变,这符合遗传物质控制性状的特征.而赫尔希等人一直以来也是认为蛋白质是遗传物质,他们研究的T2噬菌体结构简单,仅含DNA和蛋白质,看起来是一个验证遗传物质是蛋白质的好材料.他们根据遗传物质能够传递给后代这一特征来设计实验,该实验的关键是子代噬菌体中检测到了大量标记DNA的32P,而标记蛋白质的35S在子代噬菌体中几乎检测不到.这一结果出乎他们的意料,因而他们的观点也开始转向DNA更可能是遗传物质.
赫尔希等人设计的噬菌体侵染细菌实验较为复杂,为了让学生更容易理解该实验,教学中很多教师往往先介绍噬菌体侵染细菌的具体过程,再介绍噬菌体侵染细菌实验.这样的教学顺序让学生误以为赫尔希等人实验开始前已经知道噬菌体注入细菌的是DNA,失去了对噬菌体侵染实验设计过程所蕴含的科学思维分析.
事实上,1939年,“噬菌体小组”发起人之一德尔布吕克与埃里斯共同发表了“噬菌体的生长”一文,测定了噬菌体的生长曲线,表明噬菌体的生长可分为三个阶段:潜伏期、生长期和释放期,明确了噬菌体在细菌中增殖,但当时尚不清楚噬菌体将DNA注入了细菌中(图1).
1942年夏天,安德森等人用电子显微镜拍摄到了噬菌体侵染细菌的显微照片,他们惊讶地发现噬菌体有个小尾巴,并且通过尾巴吸附在细菌表面,他们说:“这看起来像个大号皮下注射器,它们似乎把什么东西注入细胞中去”(图2)
因此,赫尔希等人并不清楚噬菌体的侵染细菌的具体过程,但是对其过程已有一定的推测:噬菌体外壳留在细菌外,推测注人的物质应该是控制遗传的部分,赫尔希等人的实验结果补充了该过程的部分细节。德尔布吕克、赫尔希和卢里亚也于1969年共同获得了诺贝尔医学或生理学奖,获奖理由就是发现了病毒的复制机理及遗传结构”。
32P和35S能否通过放射性区分?
放射线是不稳定元素衰变时从原子核中放射出来的有穿透性的核辐射,主要包括以下几种:α射线(释放的是α粒子,α粒子是带有两个正电荷的氦核,具有较高的质量和较低的速度,穿透力较弱,通常只能穿透一定厚度的纸或薄金属);β射线(释放的是带负电的电子,由放射性核素衰变为中子并释放出一个电子,具有较小的质量但速度很快,穿透力较强,可以穿透大多数金属和有机物质);r射线(放射性核素由较高能态跃迁为较低能态时多余的能量转换为一种波长很短的电磁波,穿透性很强)。32P、35S衰变时释放的放射线都是射线,即电子流,本质上没有区别,在当时不能区分。
35S标记的噬菌体侵染细菌实验中,沉淀物中含有少量放射性的原因赫尔希等人的论文中对此有所阐释,搅拌是利用水流的剪切力将噬菌体从细菌表面剪切下来,在保证细菌结构稳定的前提下,搅拌不可能将吸附在细菌表面的噬菌体全部剥离,大约有20%~30%左右的噬菌体无法剥落下来,致使这部分噬菌体外壳随细菌在离心时沉淀到试管底部,因而沉淀物中含有少量放射性。
32P标记的噬菌体侵染细菌实验中,上清液中含有少量放射性的原因对此现象常见的解释:保温时间太短,有部分筮菌体未吸附到细菌上或保温时间过长,导致部分子代噬菌体被释放出来,留在上清液中。若真如此,赫尔希等人的实验操作就非常不严谨。事实
上,作为科学史上的著名实验,赫尔希等科学家在实验操作时都是十分严格的。参照赫尔希等人的京文所述,赫尔希等人事先已经严格测定了在不同品度下噬菌体侵染细菌到噬菌体从细菌中释放的
生长曲线(如图1)。确定菌体的潜伏时间为18~22min,约25m
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