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感受态的制备与转化,质粒提取(原理和操作步骤).docx

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    天马波波

    天马波波

    感受态的制备与转化，质粒提取〔原理和操作步骤〕

    感受态细胞:理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来 DNA的生理状态。即指细菌细胞在肯定的生长阶段，自身或通过人为处理而具有摄取外源DNA并使其基因型和表现型发生相应变化的力量。如大肠杆菌经CaCl2处理，就成为简洁受质粒DNA转化的细胞。

    一般来说,感受态细胞的最根本要求是：1、没有质粒

    2、简洁被转进去〔一般是G-细菌，细胞壁薄〕

    3、养分条件一般，非苛养菌

    CaCl2法：

    操作原理：

    将快速生长的大肠杆菌置于经低温〔0℃〕预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细

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