分析化学综合实验.ppt

?依据大豆试样参考值367mg/100g，?滴定分析要求T·E0.2%,滴定效耗EDTA的体积是：可配制C(EDTA)=0.005mol·L-1，mL≤V(EDTA)≥mL.大豆称样量估算如下：2.估算大豆试样称样量21?EDTA采用基准物CaCO3标定，称取一定量的CaCO3，溶解后定容250.0mL，分取量范围是：00mL平行五份，为满足滴定误差的要求，滴定时消耗EDTA的体积要在20-25mL之间，则基准物CaCO3称样量的称433.估计基准物的称量范围:主要试剂分析化学综合实验开放性设计实验01开放实验教学，培养独立工作能力；02针对实际样品写出可行性设计实验方案；03综合运用实验技能；04培养查阅资料能力，运用知识的能力。实验目的开放式设计研究实验题目奶粉中蛋白质含量测定油条等食物中铝含量的测定大豆中钙、镁含量测定食品分析方面参考书可在超星图书馆下载《食品科学》杂志以及其他中文期刊网上查阅相关资料（搜索）中华人民共和国国家标准相关的教材《分析化学实验》、分析化学校园网-图书馆-中国期刊网资料来源设计方案要求1.实验题目2.作者姓名、学号）3.前言（简单表述）4.设计原理：总体设计思想，可用框图简单表示；设计中的理论计算（方案可行性），设计报告重 点部分。要求做到思路清晰，理论正确，计算 准确，步骤详细，测定结果的公式表达（量化 依据）要准确、规范，固体试样用质量分数表 示，水质试样用质量浓度表示。 （可以灵活运用表格）010225%50%5.主要仪器和试剂：试剂选择要有依据，取量范围要有计算依据，配制、标定方法要有可行性操作规程。6.分析测试方法：自拟的操作规程要有切实的可操作性，越详细越好。01实验报告要求02?设计实验报告是在设计总体思想的指导下，具体实施，取得实验成果后的具体体现。具体要求如下：?1-6同设计报告，?7.原始记录（要求齐全）。?8.实验结果与数据处理：设计实验报告的重点部分，体现实验成果的部分，要求列出三线格，表序、表头、表注均表达清楚。?9.参考文献?10.写出设计总结（心得体会、经验教训、误差分析、教学建议等）。奶粉中蛋白质含量的测定030201奶粉中蛋白质含量10-20%蛋白质含量测定的意义蛋白质含量的测定方法：凯氏定氮法、双缩脲法、folin酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法及氨基酸分析仪法奶粉中蛋白质含量的测定双缩脲法：双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。A紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。B实验原理实验原理考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝G-250（CoomassiebrilliantblueG-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1000μg/mL，最小可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。实验原理紫外吸收法：蛋白质组成中长含有酪蛋白和色氨酸等芳香族氨基酸，在紫外光280nm波长处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可用紫外分光光度计通过比色来测定蛋白质的含量。由于核酸在280nm波长处也有光吸收，对蛋白质测定有一定的干扰作用，但核酸的最大吸收峰在260nm处。如同时测定260nm的光吸收，通过计算可以消除其对蛋白质测定的影响。因此如溶中存在核酸时必须同时测定280nm及260nm的吸光度，方可通过计算测得溶液中的蛋白质浓度。提供以上三种测试方法供选择；设计实验注意：根据所选测试方法，估算样品处理与称量的量；主要试剂及用量；实验步骤