检测技术方法.ppt

准确度是指测定结果与真值（或靶值）接近的程度。准确度不能以数字表示，往往用不准确度来衡量。测定结果与靶值的偏离程度称为偏差，它表示该项检验的不准确度。

绝对偏差=检验的均值-真值（或靶值）

相对偏差=绝对偏差真值÷（或靶值）×100%第63页,共100页，星期六，2024年，5月精密度

是指对同一样本重复测定时，每次测定结果与平均值的接近程度，即重复测定值之间的符合程度。第64页,共100页，星期六，2024年，5月标准品1、国际标准品由WHO或相应组织标定的，用肯定的、公认的、准确的物理或化学方法测定的定值材料。

2、国际生物学活性标准品根据生物学反应由WHO或相应组织标定的国际活性单位的材料。

3、参考标准血清国家标准化组织根据国际标准化生产的法定材料。可用于鉴定仪器和鉴定方法准确性。第65页,共100页，星期六，2024年，5月质量控制血清质控血清是已有靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内，就说明该检验没有发生不允许的误差。如果出现超过允许误差范围的异常结果，提示该检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检待测标本。因此质控血清在质控工作中起重要作用。第66页,共100页，星期六，2024年，5月室内质量控制程序临床检验的检测结果，每次或每天之间不可能没有误差。决定允许的误差范围，以临床上不造成误诊与漏诊为准，通过以下步骤来确定质控范围。

1）最佳条件下的测定误差。

2）已知值的血清在常规检验条件下的误差。

3）未知值的血清在常规检验条件下的误差。

4）临床应用的要求。对任何一个试验都应确定一个允许的误差范围，前题是满足临床要求。如允许误差定得过小，在临床上不存在任何意义，但为了符合该规定却要花费很大人力、物力和时间。相反，如果将允许误差定得过大，将使监测系统察觉不到临床上要求检出的误差，失去质控的意义。第67页,共100页，星期六，2024年，5月辅助材料生物活性材料称量包被液/封闭液配制包被/封闭微孔板干燥微孔板真空包装微孔板其他组分配制液体分装检验检验检验检验标签粘贴试剂盒组装试剂盒入库说明一般生产区十万级洁净区质控点质控要点1质控要点2质控要点3质控要点4第68页,共100页，星期六，2024年，5月酶免疫测定操作中的注意事项标本的收集和保存试剂准备加样温育洗板显色比色结果判断结果报告及解释第69页,共100页，星期六，2024年，5月标本的收集和保存

一般为血清标本，此外亦有唾液、尿液等其它体液；避免严重溶血，否则可能会增加非特异显色；避免细菌污染，否则会因菌体中内源性HRP而产生假阳性反应；避免反复冻融；血清如有混浊或沉淀，离心或过滤后检上清第70页,共100页，星期六，2024年，5月试剂准备从冰箱中取出的试剂，待温度与室温平衡后使用；所用蒸馏水或去离子水应保证质量。第71页,共100页，星期六，2024年，5月加样避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。第72页,共100页，星期六，2024年，5月温育

常采用的温育温度有43℃、37℃、室温和4℃等。温育所需时间与温度成反比，即温育温度高，则所需时间相对较短。温育时，微孔板应置于水浴（浮于水面）或湿盒中，以使反应溶液的温度迅速与温室平衡。第73页,共100页，星期六，2024年，5月洗板每次温育后洗板是否彻底，与非特异背景显色有很大关系。第74页,共100页，星期六，2024年，5月显色加入底物A和B后，应振荡混匀当底物为OPD时，显色反应应避光进行第75页,共100页，星期六，2024年，5月比色

加酸终止显色反应后，比色测定前应振荡混匀测定时，要注意酶标仪的波长是否已调至合适比较好的酶标仪可选择单波长或双波长比色测定，所谓双波长比色，即在敏感波长（此时对所显色具最大光吸收）如450nm和非敏感波长（所测得的光吸收为微孔板上的划痕、污迹以及指纹等所致），最后从仪器得到的读数为在敏感波长测得的吸光度与非敏感波长测得的吸光度之差。第76页,共100页，星期六，2024年，5月结果判断按照试剂盒确定的Cut-off值判断结果ELISA测定的“灰区”（可疑结果的含义）第77页,共100页，星期六，2024年，5月定性？定量？定性测定常以“有”或“无”也即“阳性”或“阴性”来表达测定结果；半定量测定虽介于定性和定量之间，但从严