诺如病毒实验室检测方法、诺如病毒胃肠炎的病原学、流行病学及临床表现.pdfVIP

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附录A

（规范性）

诺如病毒实验室检测方法

A.1样本采集、保存及运输

A.1.1标本采集

采集发病天内的便标本或肛拭子样本以及新鲜的呕吐物标本。优先采集粪便，无法及时采集粪便

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标本，可考虑采集肛拭子或呕吐物。对于暴发或聚集性疫情，明确为NoV感染引起后，部分症状较轻

且流行病学关联明确的病例可不采集标本进行检测。

A.1.1.1粪便：每份标本量不少于1g或1mL，置于无菌容器内。

A.1.1.2肛拭子：采集时，使用无菌生理盐水润湿拭子，将拭子插入肛门2-3厘米，在肛门内轻轻旋

转或从肛门周围的褶皱处擦拭，肛拭子需要带有粪便，然后将其插入含有生理盐水或病毒保存液的试管

中。

A.1.1.3呕吐物：每份呕吐物标本采集不少于1g或1mL，置于无菌容器内。

A.1.2标本保存及运输

标本可冷藏（℃）保存天；如天内不检测，应在℃及以下保存，避免反复冻融；运输途中

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应注意防溢洒；采用公共交通工具运输时，应按照B类包装和UN3373要求运输。

A.2标本检测

标本首选核酸检测，呕吐物和肛拭子标本不推荐抗原或病毒形态检测。

A.2.1诺如病毒特异性核酸检测

A.2.1.1实时逆转录-聚合酶链反应

可采用商品化的实时逆转录-聚合酶链反应试剂盒检测标本中的NoV核酸，检测方法和结果判定可

参考试剂盒说明书。腹泻疾病监测或NoVGE暴发/聚集性事件处置时也可按表A.1引物和探针进行检测。

表A.1多重实时逆转录-聚合酶链反应扩增NoV的引物和探针

分组引物/探针序列（5-3）工作浓度（nmol/L）

Cog1FCGYTGGATGCGITTYCATGA400

GICog1RCTTAGACGCCATCATCATTYAC400

probeRing1EFAM-TGGACAGGRGAYCGC-MGBNFQ200

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表A.1多重实时逆转录-聚合酶链反应扩增NoV的引物和探针（续）

工作浓度

分组引物/探针序列（5-3）

（）

nmol/L

Cog2FCARGARBCNATGTTYAGRTGGATGAG400

GIICog2RTCGACGCCATCTTCATTCACA400

probeRing2Cy5或QUASAR670-TGGGAGGGCGATCGCAATCT-BHQ2200

A.2.1.2逆转录聚合酶链反应

可采用逆转录聚合酶链反应法扩增编码NoV聚合酶区和/或衣壳