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ICS65.020.30
CCSB43
21
辽宁省地方标准
DB21/T3493—2021
牛体外受精胚胎生产及非手术法移植技术
操作规程
2021-08-30发布2021-09-30实施
辽宁省市场监督管理局发布
DB21/T3493—2021
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。
起草单位:辽宁省农业发展服务中心、辽宁省牧经种牛繁育中心有限公司。
主要起草人:李宁、刘海军、刘全、黄承俊、杜学海、李傲楠、张文军、张丽君、赵刚、周成利、
唐学成、安辉。
本文件发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,
我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。
归口管理部门通讯地址:辽宁省农业农村厅(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话:024
起草单位通讯地址:辽宁省农业发展服务中心(沈阳市皇姑区辽河街60号),联系电话:024
I
DB21/T3493—2021
牛体外受精胚胎生产及非手术法移植技术操作规程
1范围
本文件规定了牛体外胚胎生产的卵母细胞采集、体外成熟、体外受精、体外培养、胚胎质量鉴定、
胚胎冷冻、胚胎解冻和胚胎移植的技术要求。
本文件适用于牛体外胚胎生产及移植的技术操作。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB4143牛冷冻精液
GB/T5458液氮生物容器
GB/T25881牛胚胎
NY/T1572牛胚胎移植技术规程
DB21/T1648牛胚胎移植技术操作规程
3术语和定义
没有需要界定的术语和定义。
4仪器与溶液
4.1仪器设备
4.1.1二氧化碳培养箱
使用前在38.5℃、5%CO2、饱和湿度条件下平衡24h以上。
4.1.2超净台
使用前20min,打开风机和紫外线灯对操作台面和在超净台中使用的器材进行表面灭菌,液体操
作时应点燃酒精灯。
4.1.3恒温加热板,水浴锅
恒温加热板、水浴锅的使用温度为37℃,水浴锅中液体为蒸馏水。
4.1.4液氮罐
液氮含量不得低于容积的1/3。
4.2溶液
4.2.1常用溶液
1
DB21/T3493—2021
抗菌生理盐水(含青霉素和链霉素各0.075g/L)、采卵液、成熟液(M199)、精子洗涤液、受精
液(BO液)、胚胎培养液(CR1aa
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